低浓度喹诺酮对嗜热链球菌生理特性及蛋白组表达的影响研究Low concentration of quinolone effects on Streptococcus thermophilus physiological characteristics and proteomics.pdf

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1、＇Ｕ９０分类兮学４Ｄ１３ＵＤＣ密级敬ｉＨ义聲ＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ博壬学化冷文低浓度喧诺酬对嗜热链球菌生理特性及蛋白组表达的影响研究條霞指穿教帅姓名：顾娩霞教授，扬州大学，江苏扬州，２２５００９壬学科专化名称；动物巧性食品营养与加王工程申请学位级别：博论文提交口期：２０１４年１０月论文答辩１」期；２０１４年１１月２０１５大学学位授ｆＨ期；年１月学位授予单位：扬州答辩委员会小：席：王金玉２０１４年１２月＂低本论文研究受到国家自然科学基金青年基金项目浓度哇诺酬对嗜热＂链球菌生

2、理功能和代谢途径的影响研究（３１２０Ｂ９３）和江苏省乳品生物技术＂低浓度唾诺与安全控制重点实验室开放课题丽对嗜热链球菌细胞膜功能及＂代谢产物的影响研究化１３６０４６）资助。陈霞化浓度哇诺爾对嗜热链球菌生理特性及蛋白组表达的影响硏究１＿摘要近年来，低浓度抗生素残留在许多动物源性食品原料中存在。当这些原料被用于生产中残留的抗生素就会对作为发酵剂的现酸菌产生一发酵食品时，其定的胁迫作用。同样当人们在服用抗生素进行治疗疾病期间，人体内的Ｗ及外源补充的乳酸菌也会受到抗生素的一。胁迫作用在低浓度的抗生素作用下，为了阻止有害物质进入胞内，乳酸菌会产生

3、系列的应激反应。此时会对乳酸菌的生理特性和发酵性能产生怎样的影响，是否有不良代谢产Ｉ。物的产生，都需要进行深入研究本论文利用微生物生理学和蛋白质组学的研究手段，研＂＂（况＾〇＾０〇；１／／１７／？此＊，５７？〇究了嗜热链球菌饼＂＾？〇／．？＆６／抑祝《＾３１＾〇２在低浓度睡诺厕作用下其生理特性、发酵性能及蛋白组表法的变化，从而为全面、客观评价乳酸菌的益生特性．和安全性提供理论依据。１．低浓度哇诺丽对＆化飢《邱知７肋ｇｒｘ０２生理特性的影响测定了氧氣沙星（〇ｆｌ〇ｘａｃｉｎＯＦＸ）和环丙沙星ＣｉｒｏｆｌｏｘａｃｉｎＣＰＦ＆说ｍｗｏ，（ｐ，巧对

4、如ｒｘ０２的最小抑菌浓度（ｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎＭＩＣ），然后将Ｓ．诚ｍｗｏＷ／ｗｇｙ，ｐｇｒｘ０２分别接种于加入０、１／２、１／１０和１巧０ＭＩＣ的０防和ＣＰＦＸ的ＭＲＳ液体培养基中，测定其生长曲线的变化，分别Ｗ光镜和电镜进行形态学观察，并测定对细胞膜通透性和胞内乳糖代谢关键酶活性的影响。结果显示：＆＆ｅｍｏＭＭｓｒｘ０２对ＯＦＸ和ＣＰＦＸ的最小ｐｇ抑菌浓度分别为７．７５ｌ／ｍＬ和３．８９ｉ／ｍＬ，均为中度敏感。在１／２ＭＩＣ的ＯＦＸ和ＣＰＦＸ作＾ｇｊｇ＜２ｚ７ｒ用下，＆识ｅｍ（如ｗｇｘ０２的生长

5、速度均显著降低０化。在不同亚抑菌浓度的ＯＦＸ和＾）ＣＰＦＸ作用下，巧从ｚ７ｗｇｒｘ０２中的小菌落、微菌落数明显增多。通过透射电镜观察发现对照姐的菌体呈长楠圆形，而各药物组的菌体长度随着药物浓度的升高而明显变短。对照组的英膜较厚，比较松散，而药物组的葵膜明显的变得薄而致密，将细胞紧紧包裹住。■ｍ当ＯＦＸ和ＣＰＦＸ的浓度达到１／１０ＭＩＣ时，５．献ｏ灿加Ｓｇｒｘ０２的细胞膜通透性就会显著？＜〇－．〇５。当〇巧〇？巧的浓／２１＾（降低（）：和度达到１１１：时，＆化＾？０如诉《良仪〇２胞内的片－半乳糖巧酶和乳酸脱氨酶活力均显著降化巧＜０．０５１／ＭＩ

6、）；５０Ｃ的ＯＦＸ对Ｐ半郭糖脊酶和乳酸脱氨酶活力的影响不大，ｌ＾ＯＭＩＣ的ＣＰＦＸ对片半乳糖昔酶活力影响也不大，但使乳酸脱氨酶活力反而增大。上述结果表明，在低浓度哇诺酬的作用下，＆说ｅｍｏ如ｚ７ｗｇｒｘ０２启一动了相应的应激机制，其生理特性也发生了系列复杂的变化。２．低浓度哇诺丽对＆化ｅ／ｗｏｐＡ讯Ｍｇｒｘ０２发酵性能的影响■？研究了不同亚抑菌浓度的哇诺爾对５．妍ｍｍ如７ｗｓｇｒｘ０２的凝乳时间、产酸能力、产黏２扬州大学博壬学位论文ｆＡｅｍｏｚ７ｗｒｘ０２、、能力和蚕白水解能为的影响，Ｗ及对如ｇ发酵乳的质构特性流变特性感官特性、活菌

7、数和挥发性风味物质的影响。结果显示：当原料乳中ＯＦＸ和ＣＰＦＸ的残留量达到１／２ＭＩＣ，会使义奶ｗｍ如》？ｗｇｒｘ０２发酵现的脱水收缩性通著增大，粘附性、胶熟性和巧嚼性显著降低，蛋白水解能力显著降低，同时使发酵乳在化藏期间的活菌数显著降低Ｐ＜〇．〇５。当原料乳中ＯＦＸ和ＣＰＦＸ的浓度达到１／１０ＭＫ：时，会延长Ｓ．（）献；７Ｍ０如舶Ｓｇｒｘ０２发酵乳的凝乳时间，使＆ｆ＆ｅｍｏ如！ｇｒｘ０２发酵乳的产酸速率和黏度显ＰＣ０会对Ｓ．．０５在胆藏期间的稳定性明显降低从ｅｍｏＷ／ｗｒｘ０２著降低（，使其：ｐｇ