槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响.pdf

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1、中图分类号：R776.1SICHUANMEDICALUNIVERSITY——硕气学Mt槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响冬.院（系)、所临床医学院研究生姓名刘鹃学科、专业眼科学导师姓名康刚劲■--：■V=〇-五年四月目录1槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯11.1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31.3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91.5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯181.6讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271.7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351.8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯361.9中英文缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯422致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯433综述（槲皮素对晶状体保护作用研究进展）⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响摘要目的：本实验通过观察槲皮素(QUE)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及其凋亡调控基因bcl-2、b

3、ax表达的影响，探讨槲皮素对糖尿病大鼠晶状体的保护作用。方法：1、体重150g-180g雄性SD大鼠60只，经裂隙灯显微镜检查排除双眼晶状体病变及其它眼部疾病。适应性喂养7d后禁食12h，不禁饮，随机抽取40只予以腹腔注射1%链脲佐菌素，剩余20只大鼠则设置为正常对照组（对照组），腹腔注射等体积0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液。72h后尾静脉取血，测得空腹血糖≥16.7mmol/L为造模成功。2、将糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组（糖尿病组）和槲皮素干预组（槲皮素组）。自造模成功第二天起，槲皮素组每日给予槲皮素50mg/kg灌胃，糖尿病组和对照组每天给予等体

4、积0.5%羧甲基纤维素（CMC）灌胃。实验过程中对大鼠饮食、饮水、尿量、精神等一般情况进行每日观察及记录，每周称量体重1次并记录，每2周检测血糖1次。3、使用复方托吡卡胺滴眼液给以大鼠双眼充分散瞳，采用数码裂隙灯显微镜每周1次对各组晶状体混浊程度进行观察并记录。分别于STZ注射后4周、8周处死各组大鼠5只，12周时处死各组剩余大鼠。摘除眼球，分离晶状体，每组各时间点取5只晶状体用于固定包埋，制备石蜡切片用于HE染色及免疫组织化学法检测晶状体上皮细胞中bcl-2和bax的表达情况。各组剩余-1-四川医科大学硕士学位论文晶状体用于制备细胞悬液检测细胞凋亡。结

5、果：1、一般情况：对照组大鼠生长状况良好；采用STZ腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型，40只大鼠均造模成功并纳入实验，所有模型大鼠均出现“多饮、多食、多尿”的典型糖尿病表现。2、血糖：在实验4周、8周、12周，糖尿病组和槲皮素组血糖均高于对照组(P＜0.05)，但糖尿病组与槲皮素组比较差异不具有统计学意义(P＞0.05)。3、晶状体混浊情况：在实验研究过程中，对照组大鼠晶状体始终保持透明，随着实验进展，4周时糖尿病组、槲皮素组大鼠晶状体均开始出现不同程度混浊。4周、8周和12周时糖尿病组、槲皮素组晶状体混浊程度均比对照组重(P＜0.05)，糖尿病组晶状体混浊程

6、度比槲皮素组更重(P＜0.05)。4、HE染色：对照组晶状体上皮细胞为单层立方上皮，细胞形态规则，分布均匀，外包绕晶状体囊膜，晶状体纤维细胞未见异常。糖尿病组、槲皮素组晶状体上皮细胞形态不规则，多呈扁平状或柱状，胞质疏松染色淡，可见空泡，赤道至后囊区域内晶状体纤维细胞内可见大量未被降解的细胞器，但槲皮素组较糖尿病组少。5、免疫组化：bcl-2在三组均呈阳性表达，在4周、8周、12周时对照组与糖尿病组、槲皮素组之间表达差异有统计学意义(P＜0.05)，而随着实验进展，糖尿病组、槲皮素组表达逐渐减少，且糖尿病组弱于槲皮素组，差异有统计学意义（P＜0.05）；

7、bax在各组则均呈阳性表达，在4周、8周、12周时对照组与糖尿病组、槲皮素组之间表达差异有统计学意义(P＜-2-四川医科大学硕士学位论文0.05)，随着实验进展，糖尿病组、槲皮素组表达均逐渐增强，且糖尿病组bax的表达强于槲皮素组(P＜0.05)。6、细胞凋亡：STZ注射后4周、8周、12周时糖尿病组大鼠晶状体上皮细胞的凋亡率显著高于对照组，槲皮素组晶状体上皮细胞凋亡率较糖尿病组显著降低，但仍高于对照组。各时间点三组之间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：1、槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡有抑制作用。2、槲皮素可能通过增强bcl-2的表

8、达与降低bax的表达来对抗糖尿病大鼠晶状体上皮细胞的凋亡，抑制晶状体混浊。3、槲