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1、§5.1《DNA的粗提取与鉴定》导学案班级：高二（）班姓名：【学习目标】1.说出DNA的物理和化学性质。2.概述DNA粗提取和鉴定的原理。3.尝试对动物或植物组织的DNA进行粗提取并对其进行鉴定。【自主学习】1.提取DNA的方法和原理:(1)提取生物大分子的基本思路:选用一定的____________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。(2)提取DNA的方法:利用DNA与____、_______和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。2.DNA的溶解性:(1)DNA在NaCl溶液中的
2、溶解度:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,其中在___________NaCl溶液中溶解度最低。(2)在酒精溶液中的溶解性:____不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些_______溶于酒精溶液。3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:(1)对酶的耐受性:蛋白酶能水解_______,但对____没有影响。(2)对温度的耐受性:大多数蛋白质不能忍受_________的高温,而DNA在_____以上才会变性。(3)对洗涤剂的耐受性:洗涤剂能够瓦解_______,但对____没有影响。4.DNA的鉴定:在____
3、___的条件下,DNA与_______反应呈现蓝色。二、实验设计1.实验材料的选取:选用DNA含量_________的生物组织。2.破碎细胞,获取含DNA的滤液:(1)动物细胞的破碎。①选材及方法:选用动物细胞作为实验材料时,由于其无_______,因此可直接采用吸水涨破的方法。②过程:以鸡血为例。在鸡血细胞液中加入一定量的_______,同时用_______搅拌,细胞会吸水涨破,然后用纱布过滤,过滤后收集滤液即可。(2)植物细胞的破碎。①方法:需要先用_______溶解细胞膜。②过程:以提取洋葱的DNA为例。在
4、切碎的洋葱中加入一定的_____________,进行充分地搅拌和_____,过滤后收集研磨液。3.去除滤液中的杂质:方案一利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中_______不同,通过控制NaCl溶液的_____去除杂质方案二直接在滤液中加入_______,反应10～15min,嫩肉粉中的___________能够分解蛋白质第-4-页共4页方案三将滤液放在_________的恒温水浴箱中保温10～15min,注意严格控制温度范围4.DNA的析出:利用DNA不溶于_______________这一原理,可从DNA溶
5、液中析出比较纯净的DNA,此时DNA的状态为___________。5.DNA的鉴定:将白色丝状物溶解于5mL物质的量浓度为__________________中,再加入4mL的_______试剂,沸水浴加热5min,冷却后观察溶液的颜色,同时设计不含DNA的NaCl溶液作为对照。三、操作提示1.以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止_________。2.加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生___________,不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免
6、加剧______________,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3.鉴定DNA用的二苯胺试剂要_________,否则会影响鉴定的效果。四、实验操作从鸡血细胞中提取DNA（1）破碎细胞（释放DNA）：在鸡血细胞液中加入一定量的_______，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌（2）过滤：单层纱布过滤，滤液中含有______和其他核物质，如_______、RNA等。取_______。（3）溶解核内DNA：向上述滤液中加入物质的量浓度为______mol/L的NaCl溶液，并用玻棒沿一个方向搅拌（4）过滤：将含DNA的2m
7、ol/L的NaCl溶液用两层纱布过滤取_______。（5）析出DNA：向上述滤液中缓缓加入_______，同时用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，出现白色絮状物，当絮状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液的物质的量浓度接近______mol/L。（6）过滤：用多层纱布过滤，含_______的粘稠物留在纱布上（7）DNA再溶解：将上述粘稠物再次用______mol/L的NaCl溶液溶解（8）提取含杂质较少的DNA：向上述滤液中加入等体积的、冷却的、体积分数为95%的酒精溶液，静置2-3min,出现__________
8、____，用玻璃棒将丝状物卷起。【合作探究】主题1 DNA粗提取与鉴定的方法1.DNA溶解性原理：结合DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线，分析DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度有何特点。(1)低于0.14mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐_______。(2)高于0.14mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐__
