[原创]2012年《高考风向标》高考生物一轮复习 选修1·专题3、5 植物的组织培养技术、DNA 和蛋白质技术 配套课件.ppt

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1、专题3、5植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术考纲内容命题展望1.植物的组织培养2．蛋白质的提取和分离3．PCR技术的基本操作和应用4．DNA的粗提取与鉴定本专题内容单独出题几率不大，多分拆于必修的相关内容中，多以选择题形式出现一、植物的组织培养技术1．菊花的组织培养(1)理论基础：植物细胞的①_______。(2)基本过程外植体→愈伤组织→长出丛芽→生根→移栽(3)实验操作步骤制备MS培养基→外植体消毒→②_____→培养→③_____→栽培接种移栽全能性2．月季的花药培养(1)理论基础：花粉具有④______。(2)花粉发育过程：⑤_

2、_________、⑥________、⑦_____等阶段。四分体时期单核期双核期(3)产生花粉植株的两种途径：1)花粉→胚状体→丛芽→生根→移栽。2)花粉→愈伤组织→丛芽→生根→移栽。全能性二、DNA和蛋白质技术1．血红蛋白的提取和分离相对分子质量的(1)凝胶色谱法：也称分配色谱法，是根据⑧_________________分离蛋白质的方法。相对分子质量较小的移动速度较慢，而相对分子质量较大的无法⑨_____________，移动速度较快。(2)缓冲溶液能够抵制外界的⑩________对溶液pH的影响，维持pH⑪_________。酸和碱

3、基本不变大小进入凝胶内部(3)电泳带电粒子在⑫的作用下发生迁移的过程。电场(4)实验操作1)样品处理及粗分离红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析2)凝胶色谱柱操作凝胶色谱柱的制作→⑬→样品的加入和洗脱凝胶色谱柱的填装3)纯度鉴定用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。2．多聚酶链式反应扩增DNA片段(1)PCR原理DNA模板在一定的缓冲溶液中提供⑭链结合的两种引物、⑮、分别与两条模板、，同时控制温度使DNA复制在⑰⑯反复进行。(2)PCR的反应过程：变性→⑱→延伸。四种脱氧核苷酸耐热的DNA聚合酶体外复性DNA的粗提取与鉴定1．实验原

4、理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其变化曲线为：图1－3－1(2)DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的其他某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取含杂质较少的DNA。――(3)DNA＋二苯胺→蓝色(用于DNA的鉴定)。沸水浴2．实验流程3．实验关键(1)取材不用哺乳动物的血细胞(由于成熟红细胞无细胞核)。(2)获取DNA时要向鸡血细胞液加入足量的蒸馏水，以便使细胞膜和核膜破裂，把核内物质释放出来。(3)实验中有6次搅拌，除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝一个方向。并且，在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步骤搅拌都要轻缓，玻璃

5、棒不要直插烧杯底部，防止DNA分子断裂。(4)2次加蒸馏水①第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂(注：植物细胞是用洗涤剂溶解细胞膜)，使血细胞充分破裂。②第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶液，析出DNA。(5)2个浓度的NaCl溶液①一个是2mol/LNaCl，为了溶解DNA，使DNA与蛋白质分离。②一个是0.14mol/LNaCl，为了析出DNA。(6)DNA易吸附在玻璃容器上，所以实验中最好使用塑料烧杯、试管、容器，以减少DNA的损失。4．去除滤液中的杂质的其他方案(1)方案一：用嫩肉粉(蛋白酶)，它能水解蛋白质，但对DNA没有影响

6、。(2)方案二：加热至60℃～75℃，大多数蛋白质不能忍受60℃～75℃的高温而变性，但DNA不变性。【易错易混】预冷的酒精溶液具有的优点①抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解。②降低分子运动易于形成沉淀析出。③低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。【突破题1】下列关于DNA粗提取与鉴定的说法中，正确的是()A.析出DNA时要缓慢地加蒸馏水，当析出黏稠物时即不再加水B.在探究洗涤剂对植物细胞DNA提取的影响实验中，自变量是洗涤剂和食盐C.提取的DNA溶解后加入二苯胺试剂即可染成蓝色D.将含有DNA的滤液放在60℃～75℃的恒温水浴箱中保温

7、后过滤，能去除蛋白质杂质【解题指导】DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低而析出，方法是用蒸馏水进行稀释，直至DNA丝状物不再增加为止；探究洗涤剂对植物细胞DNA提取的影响实验中，自变量是洗涤剂；提取的DNA溶解后加入二苯胺试剂后要进行沸水浴加热和分设对照组。【答案】D蛋白质的提取和分离(以血红蛋白的提取和分离为例)1．样品处理(1)红细胞的洗涤：目的是去除杂蛋白，分离时采用低速短时间离心，直至上清液中没有黄色血浆，表明红细胞已洗涤干净。(2)血红蛋白的释放：在蒸馏水和甲苯(溶解细胞膜)作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。2．粗

8、分离(1)分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合溶液离心后，将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分离下层的红色透明液体。(3)透析：取1mL的血红蛋白溶