生物2013年高考复习课件:选修1 专题3、5 植物的组织培养技术、dna

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1、专题3、5植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术考纲内容2013年高考风向标实验:(1)植物的组织培养(2)蛋白质的提取和分离(3)PCR技术的基本操作和应用(4)DNA的粗提取与鉴定本专题内容与必修内容关联度大,多分拆于必修的相关内容中,多以选择题形式出现一、植物的组织培养技术1.菊花的组织培养全能性(1)理论基础:植物细胞的①_______。(2)基本过程外植体愈伤组织长出丛芽→生根→移栽(3)实验操作步骤接种移栽制备MS培养基→外植体消毒→②_____→培养→③____→栽培2.月季的花药培养(1)理论基础:花粉具有④______。全能性(2)花粉发育过程:⑤__________、⑥

2、_______、⑦______等阶段。四分体时期单核期双核期(3)产生花粉植株的两种途径植物组织培养所用的培养基为固体培养基。()√二、DNA和蛋白质技术1.DNA的粗提取与鉴定(1)实验原理不同0.14mol/L不蓝色1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度⑧_____,浓度为⑨___________时其溶解度最小。2)DNA⑩___溶于酒精溶液。3)DNA与二苯胺在沸水浴中呈⑪_____。杂质(2)实验步骤:选材、制备鸡血细胞液→破碎细胞,获取含DNA的滤液→去除滤液中的⑫_____→DNA析出与鉴定。2.血红蛋白的提取和分离相对分子质量(1)凝胶色谱法:也称分配色谱法,是根据⑬_

3、_________________分离蛋白质的方法。相对分子质量较小的移动速度较慢,而相对分子质量较大的无法⑭_____________,移动速度较快。(2)缓冲溶液:能够抵制外界的⑮_______对溶液pH的影响,维持pH⑯___________。(3)电泳:带电粒子在⑰_____的作用下发生迁移的过程。进入凝胶内部酸和碱基本不变电场的大小(4)实验操作1)样品处理及粗分离红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析2)凝胶色谱柱操作凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的制作→⑱__________________→样品的加入和洗脱3)纯度鉴定:用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。3.多聚酶链式

4、反应扩增DNA片段(1)PCR原理DNA模板四种脱氧核苷酸在一定的缓冲溶液中提供⑲___________、分别与两条模板链结合的两种引物、⑳______________、_________________,同时控制温度使DNA复制在_____反复进行。(2)PCR的反应过程:变性→_____→延伸。耐热的DNA聚合酶体外复性PCR扩增包括三个环节,变性、复性(退火)、延伸,这三步的温度依次是()AA.95℃、55℃、72℃C.55℃、95℃、72℃B.72℃、55℃、95℃D.80℃、60℃、72℃解析:PCR扩增的原理就是利用DNA耐高温的特性,使DNA在95℃左右双链解螺旋,然后在低温

5、(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3′端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以5′~3′方向延伸,合成DNA新链。考点植物的组织培养1.影响植物组织培养的因素(1)内部因素:材料的选取。(2)外部因素:营养成分的种类及配比;植物激素的用量及使用顺序;pH、温度、光照等。2.获得成功的关键(1)植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,对培养条件要求较高。(2)培养材料一旦被微生物污染,就会导致实验失败。原因是微生物增殖快,生长迅速,消耗养分多,并产生代谢废物毒害培养材料。(3)无菌技术主

6、要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒或灭菌。使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高3.植物激素在组织培养过程中的重要作用(1)使用顺序不同,结果不同(2)用量比值不同(生长素比细胞分裂素),结果也不同①高:利于根的分化、抑制芽的形成。②低:利于芽的分化、抑制根的形成。③适中:促进愈伤组织的形成。4.实验操作中应注意的几个问题(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药的培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2

7、)外植体消毒:所用的消毒剂是体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季花药的培养不需光照,而在后期均需光照。单倍体育种与花药组织培养的区别花药组织培养形成的是高度不育的单倍体植株;而单倍体育种则需要把对花药进行组织培养得到的单倍体植株诱导为染色体数目正常的纯合植株,以使其有正常的繁殖能力,再从中挑选出具有优良性状的个体。【典例1】植物

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