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时间:2020-04-03
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1、专题3植物的组织培养技术基础知识梳理一、菊花的组织培养1.理论基础:植物细胞的。2.基本过程:全能性再分化脱分化基础知识梳理3.影响因素(1)材料:、年龄、保存时间长短等(2)营养①无机营养a.大量元素。b.。②有机营养:、甘氨酸、、肌醇以及蔗糖等。种类微量元素维生素烟酸基础知识梳理(3)激素:和细胞分裂素。(4)pH:左右。(5)温度:18~22℃。(6)光照:每日光照12h。4.实验操作步骤:制备MS培养基→外植体消毒→→培养→→栽培生长素5.8接种移栽基础知识梳理二、月季的花药培养1.理论基础:花
2、粉具有。2.花粉发育过程:、单核期、等阶段。3.产生花粉植株的两种途径:全能性四分体时期双核期基础知识梳理4.操作关键(1)选材①要选择、的花蕾。②花粉最好处于,花药培养的成功率最高。③确定花粉发育时期最常用的方法是和,可以将细胞核分别染成红色和蓝黑色。初花期完全未开放单核期细胞核由中央移向细胞一侧的时期醋酸洋红法焙花青—铬矾法基础知识梳理(2)接种①剥离花药尽量不损伤花药,否则接种后容易。②要,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或的形成。(3)培养:花药培养一段时间后开裂,或释放出胚状体。要将前者及时
3、转移到分化培养基上,如释放出胚状体,要尽快在花药开裂后,将,分别移植到新的培养基上。从受伤部位产生愈伤组织彻底去除花丝胚状体长出愈伤组织幼小植株分开核心要点突破一、植物组织培养的基本过程及影响因素1.培养过程(1)菊花组织培养过程核心要点突破(2)月季的花药培养核心要点突破2.影响植物组织培养的因素(1)内因:植物的种类,同一植物材料的年龄、保存时间的长短等。(2)外因①营养a.矿质元素。b.有机物。②调节剂(生长素、细胞分裂素)a.使用顺序不同→结果不同。b.两者用量比例不同→发育方向不同。③环境条件
4、:温度、pH、光照等。核心要点突破【易误警示】一旦发现培养物被污染,特别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶进行清理。核心要点突破3.实验操作中应注意的几个问题(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药的培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程:在
5、初期,菊花的组织培养需光照,月季花药的培养不需光照;而在后期均需光照。核心要点突破即时应用1.下列有关花药离体培养,说法错误的是()A.对材料的选择最常用的方法是焙花青——铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B.材料消毒时需先用酒精浸泡,然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡,最后用无菌水冲洗核心要点突破C.接种花药后一段时间内不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.若接种的花药长出愈伤组织或形成胚状体后,要适时转换培养基,以便进一步分化成再生植株解析:选A。确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法,有些
6、植物细胞核不易着色时,需采用焙花青—铬矾法。核心要点突破二、植物激素在组织培养过程中的重要作用生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点为:核心要点突破激素使用实验结果使用顺序先生长素后细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先细胞分裂素后生长素细胞既分裂也分化生长素与细胞分裂素同时使用分化频率提高生长素用量与细胞分裂素用量的比例该比值高时利于根的分化,抑制芽的形成该比值低时利于芽的分化,抑制根的形成该比值适中时促进愈伤组织的生长核心要点突破即时应用2.利用植物组织培养的方
7、法可快速、大量地繁殖植物。在培养过程中,取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中,花芽的生长状况如下表所示:核心要点突破A组花芽B组花芽C组花芽D组花芽E组花芽吲哚乙酸03ppm3ppm0.03ppm0细胞分裂素00.2ppm0.002ppm1.0ppm0.2ppm花芽生长情况组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩枝稍生长核心要点突破请据表回答下列问题:(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是________组。从实验结果可以看出,能诱导新芽形成的条件是___
8、_____________________________________________________________________________________________。核心要点突破(2)上述实验结果表明,在植物组织培养过程中,诱导芽和根形成的关键是_____________________________________________________________________________。在生产实践中,欲快速
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