基于LC-MS与~1H NMR方法的热应激奶牛代谢组学研究.pdf

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1、■—＇．ｒ■－．；；分类号密级’ＵＤＣ编号—中国农业科学晓博±后研究工作报告１ＬＣ－ＭＳ与Ｈ基于ＮＭＲ方法的热应激奶牛代谢沮学研究－－ＭｅｔａｂｏＬＣＭＳａｎｄＮＭＲｂａｓｅｄｌｏｍｉｃｓＳｔｕｄｙｏｎＨｅａ－ｔｓ化ｅｓｓｅｄＬａｃｔａｔｉｎｇＤａｉｒＣｏｗｓｙ姓名；田鹤专业：动物营养与饲料科学合作导师：王加启研究员单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所０６年５月出站日期：２１－．？－基于ＬＣ－ＭＳ与巧ＮＭＲ方法的热应激奶牛代谢组学研究－ＭＳ

2、－ＬＣａｎｄＮＭＲｂａｓｅｄＭｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓＳｔｕｄｙｏｎＨｅａｔ－ｓ化的ｓｅｄＬａｃｔａ枯ｎＤａＣｏｗｉｒｓｇｙ博±后姓名：田鹤合作导师：王加后研究员流动站一（级学科）名称：畜牧学专业（二级学科）名称：动物营养与饲料科学研究工作起始时间：２０１３年８月２０１６５完成博±后工作时间：年月中国农业科学院研究生院（北京）２０１６年５月独创性声明本人声明所皇交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标荘和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研

3、究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证一书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并衷示了谢意。博±后签名：＼身修３时间：：ｉ〇Ｕ年＾貝］关于论文使用授权的声明、本人完全了解中国农业科学院有关保留使用学位论文的规定，即；中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。—么博ｉ后签名：Ｉ时间：年Ｓ月曰荷）３；之时间

4、合作导师签名：万年中国农业科学院博壬后研巧工作报吿摘要本论文重点采用超快速液相色谱仪（ＵＦＬＣ）与质谱（ＭＳ／ＭＳ）１ＨＮＭ民联用技术，同时利用技术检测无偏向性、结构鉴定能力强的１ＵＦＬＣ－ＭＳ／ＭＳ与ＨＮＭＲ优势，开展了技术整合的热应激奶牛血浆与牛奶代谢组学研究，寻找奶牛热应激诊断标志物、揭示其生理机制。本论文的研究内容包括Ｗ下３部分：－１．基于ＬＣＭＳ技术的热应激奶牛血浆代谢组学研究ＵＦＬＣ－ＭＳ技术的代谢组学方法，结合多变量统计分析采用基于，开展了热应激奶牛血浆代谢姐学研究。通过非热应激与热应激奶牛血浆样本的代谢组比对

5、分析，发现２５个与热应激诊断相关的可能生物、标志物，分别是葡萄糖（ｇｌｕｃｏｓｅ）郭酸（ｌａｃｔａｔｅ）、鸟氨酸（ｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、瓜氨酸（ｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅ）、精氨酸（ａｒｇｉｎｉｎｅ）、脯氨酸（ｐｒｏｌｉｎｅ）、肌酸（ｃｒｅａｔｉｎｅ）、尿素（ｕｒｅａ）、花生四帰酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ）、油酸（ｏｌｅｉｃａｃｉｄ）、亚油酸Ｏｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ）、植物銷氨醇（ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ）、二氮神经销氨醇（Ｃ１６Ｓｐｈｉｎｇａｎｉｎｅ）、胆碱（ｃｈｏｌｉｎｅ）、溶血磯脂醜胆碱ｌｓｏＰＣ０；０／１８：０＞ｌｓｏＰ巧１８

6、：０、ｌｓｏＰＣ１６：０、ｌｓｏＰＣ１８：０、ｙ（）ｙ）ｙ（）ｙ（）ｌｓｏＰＣ１８、ＰＣ：１６：０／１４：０、ＰＣ１４１＾８３、ＰＣ１２０／２２２、ｙ（巧卵磯脂（）（：：）（：：）／ＰＣ１５：１／１８：２、ＰＣ０：２八２：０、ＰＣ１８：１／１８：３。这些潜在标志物所参与（）口）（）代谢通路分析表明，热应激导致奶牛体内碳水化合物、氨基酸和脂类代谢发生素乱。２．基于哨ＮＭＲ技术的应激奶牛血浆代谢组学研究ｉ在奶牛热应激血浆代谢姐ＬＣ－ＭＳ研究基础上ＨＮＭＲ技，采用一。术，进步开展研究通过非热应激与热应激奶牛血浆样本的代谢组分析，发现２１个与热

7、应激诊断相关的可能生物标志物，分别是乳酸Ｉ中国农业科学院巧王后研巧工作报告摘要（ｌａｃｔａｔｅ）、丙酉同酸（ｐｙｒｕｖａｔｅ）、葡萄糖（ｇｌｕｃｏｓｅ）、脯氨酸（ｒｏｌｉｎｅ）、ｐ赖氨酸ｌｓｉｎｅ）、肌氨酸酢（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）、（ｌｃｉｎｅ）、（ｙ甘氨酸ｇｙ苏氨酸（ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ）、异亮氨酸（ｉｓｏｌｅｕｃｉｎｅ）、亮氨酸（ｌｅｕｃｉｎｅ）、肌酸（ｃｒｅａｔｉｎｅ）、ｔ－乙醜乙酸（ａｃｅｔｏａｃｅａｔｅ）、丙丽（ａｃｅｔｏｎｅ）、２哲基了酸（目－Ｈｄｒｏｘｂｕ