电磁辐射对原代培养的皮层神经元中tau 蛋白磷酸化的影响.doc

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1、电磁辐射对原代培养的皮层神经元中tau蛋白磷酸化的影响李丽,张彦文,陈前,屈明班,张广斌,余争平(400038重庆,第三军医大学军事预防页学院劳动卫生学教研室,电磁辐射医学防护教育部重点实验室)[摘要]日的研究电磁辐射对原代培养皮层神经元蛋白磷酸化的影响。方法原代培养大鼠皮层神经元分为假辐照组和辐照组,辐照组采用平均功率密度为90mW/cm-的电磁波辐照10min,分别与辐照后0、1、3、6、12h取材。采用CCK-8检测电磁辐射辐照后神经元i舌件Westernblot检测tau蛋白磷酸化位点ser199/202>ser396、serlOl

2、磷酸化变化,同时观察细胞周期素依赖性蛋白激酶5(eye1independentkinase5,CDK5)抑制剂Roscovitine>糖原合成激酶-3B(glycogensynthasekinase-33,GSK-3B)抑制剂氯化锂(Licl)和钙激活蛋白酶(calpain)抑制剂PD150606对电磁暴霭后tau蛋白磷酸化水平的影响。结果电磁辐射辐照后6h和12h,原代培养大鼠皮层神经元细胞活性明显降低(与假辐照组比分别升高19%(K0.05)和30%(/K0.01)。电磁辐射辐照后1h和3h,原代培养大鼠皮层神经元tau蛋白serlOl

3、位点磷酸化程度一过性增强[与假辐照组比较,分别升高89%(ZK0.01)和46%(/K0.05)],而serl99/202、ser396位点磷酸化程度变化不明显(/>0.05)。Roscovitine、Licl和PD150606对电磁辐射引起的tau蛋口serlOl位点过度磷酸化有显著抑制作用[与辐照组比较,分别降低82.2%、88.2%、78.5%(/K0.01)和71.6%、65.6%、72.8%(/K0.01)]0结论电磁辐射可引起原代培养的皮层神经元tau蛋白ser404位点过度磷酸化,CDK5、GSK-3Pcalpain参与其中。

4、[关键词]辎射;神经元;Tau蛋白质类;磷酸化[中图法分类号]R146:R33&1;R394.2[文献标志码]AEffectsofelectromagneticirradiationontauphosphorylationinprimaryculturedratcorticalneuronsLiLi,ZhangYanwen,ChenQian,QuMingyue,ZhangGuangbin,YuZhengping(DepartmentofOccupationalHygiene,KeyLaboratoryofElectromagneticRad

5、iationProtcctionofMinistryofEducation,CollegeofMilitaryPrcvcntivcMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofelectromagneticirradiationontauphosphorylationinprimaryculturedratcorticalneurons・MethodsRatcorticalne

6、uronswereisolatedfromneobornratsdividedintocontrolgroup,microwaveexposuregroup・Andthenmicrowaveexposuregroupcellsexposedtotheelectromagneticwave(atpeakpower90mW/cm2)for10min・EffectsofelectromagneticexposureoncellularviabilityofneuronswereevaluatedbyCCK-8Kit.Thephosphorylat

7、ionlevelsoftauproteinatser199/202,ser396andser404weredetectedbyWesternblottingat0,1,3,6and12hafterexposure・AtthesametimetheprimaryculturedcorticalneuronswerepretreatedwithRoscovitinc,aninhibitorofcyclindependentkinasc5(CDK5),lithiumchloride(LiCI),aninhibitorofGSK-3p,andPD1

8、50606,aninhibitorofcalpain,6hbeforeelectromagneticirradiation・ResultsThecellularviability

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