间断性缺氧对小鼠海马tau蛋白磷酸化的动态影响

间断性缺氧对小鼠海马tau蛋白磷酸化的动态影响

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1、分类号:R741.02密级:公开学号:2010109066单位代码:10759石河子大学硕士学位论文间断性缺氧对小鼠海马tau蛋白磷酸化的动态影响学位申请人刘静指导教师徐江涛教授申请学位门类级别医学硕士学科、专业名称内科学研究方向睡眠医学所在学院医学院中国·新疆·石河子2013年06月THEEFFECTOFINTERMITTENTHYPOXIAONPHOSPHORYLATEDTAUINHIPPOCAMPUSOFMICEADissertationSubmittedtoShiheziUniversit

2、yInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByLiuJing(InternalMedicine)DissertationSupervisor:Prof.XuJiang-taoJun,2013目录中文摘要………………………………………………………………………………Ⅰ英文摘要………………………………………………………………………………Ⅱ英文缩略词……………………………………………………………………………Ⅲ前言

3、……………………………………………………………………………………1材料和方法……………………………………………………………………………41材料………………………………………………………………………………42方法………………………………………………………………………………53统计分析…………………………………………………………………………7结果……………………………………………………………………………………8讨论……………………………………………………………………………………15结论……………………

4、………………………………………………………………22参考文献………………………………………………………………………………23文献综述………………………………………………………………………………28致谢……………………………………………………………………………………33作者简历………………………………………………………………………………34导师评阅表……………………………………………………………………………35摘要目的:观察间断性缺氧(intermittenthypoxia,IH)对小鼠海马tau蛋

5、白磷酸化水平及相关酶表达的影响。方法:选取雄性8周龄昆明小鼠30只,随机分为对照组(n=5)和IH组(n=25)。对照组置于对照箱内不给予IH处理,8小时后取脑组织待测。IH组置于间断性缺氧箱内给予IH处理8小时,分别于IH后1h、6h、12h、24h及48h取脑组织待测。HE染色观察海马神经细胞形态变化,免疫组化法观察海马区总tau蛋白(T-tau)、磷酸化tau蛋白(P-tau)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)及磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P-P38MAPK)的表达,检测各蛋白阳性表达

6、的平均光密度值(OD值)。结果:1、HE结果显示:IH后可见细胞间隙增宽,细胞数目减少、排列疏松,随着时间的延长部分细胞呈萎缩状、染色质颗粒欠清晰,部分细胞出现胞浆减少、胞核固缩,浓染。2、免疫组化结果显示:(1)各组间T-tau表达差异无统计学意义;(2)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-tau的平均OD值分别为0.104±0.008、0.125±0.015、0.137±0.013、0.159±0.021及0.128±0.020,除IH后1h外其余各组均高于对照组(0.104±0.00

7、8,P<0.05);24h组高于其他各组(P<0.05);P-tau阳性表达在IH后随着时间的延长发生变化,其平均OD值在IH后6h开始增加,IH后24h达到高峰后下降,于IH后48h仍然高于正常对照组。(3)IH后1h、6h、12h、24h及48hGSK-3β的平均OD值分别为0.089±0.011、0.108±0.018、0.119±0.014、0.137±0.019及0.109±0.016,除IH后1h外其余各组均高于对照组(0.079±0.009,P<0.05);24h组高于除IH后12h

8、外的其余各组(P<0.05);GSK-3β的平均OD值在IH后6h开始增加,IH后24h进一步升高后下降,于IH后48h仍然高于正常对照组。(4)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-P38MAPK的平均OD值分别为0.112±0.015、0.133±0.014、0.153±0.020、0.124±0.015及0.112±0.017,IH后各组P-P38MAPK的阳性表达均高于对照组(0.091±0.009,P<0.05);12h组高于其他各组(P<0.05),P-P38MA

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