粟酒裂殖酵母Trz2参与线粒体RNA加工和细胞凋亡的功能研究.pdf

《粟酒裂殖酵母Trz2参与线粒体RNA加工和细胞凋亡的功能研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、於：：：、菌訂竿：麵亡：寬製满‘．葬＇轉－誦韓：；录雛Ｖ二．、‘．＇．－！．．■Ｊ、．、？．．．、．．ｆ．．端’ｆ．／‘、；，．＼Ｖ、＇｝．ｓ、ｉ；．‘．。－－／？？１。Ｖ级：－ＵＸａ＾裤釋踢知耀、；Ｖ带读錄＃钱素＼＇．．．．議；乂．謂．纖舞麻議蒙編麵礎聊哪難；ｉ屬議自嘯法酱辕義；度％１＾＾购藝證芸聲＾＇－阵巧矜弯賴：苗站接＃．霉琴豁麵、．．．．’’．．－，．‘、‘：，．‘－＾，；＇＞，二．？：，‘冷、－＇‘Ｖ４，．ｘ古（与‘於殖麟贿觀臟髮幸．：．．讓；：難龜，美辨論邀耗麵ｉ議參：：－方．；嘴．：裳马：

2、疗礙爭每．满接讀類：；读誠漏麵難舅馨ｉｉ！＂—旷．，＇：养各卷Ａ．；．诏：打．討分；解装锭導楼齡－々觀ｒ誘誉学＊．？鶴梦麵／ａ戀咬ｐｉ．＊Ｗ紐：遞撕．福婚熱嚷的苗％＞二乃璋．－、巧藏禹姨蘇終培户女减豕．学位论文独创巧声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作和取得的研究成果。本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研巧所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。＂日期学位论文作者签名寺Ｉ：学位论文

3、使用授权声明研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属南京师范大学。学校有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可Ｗ借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可（＾采用影印、复印等手段保存、汇编本学位论文。学校可＾＾向国家有关机关或机构送交论文的电子和（纸质文档，允许论文被査阅和借阅。保密论文在解密后遵守此规定）；本学位论文属于保密论文，巧级；保密论文注释保削舰为年。学位论文倘签备．ｉ日期；＞Ｕ乂日期；＾摘要一线粒体是真核生物细胞中种重要的细胞器。最近的研充表明，线粒体的功能失调与多种疾病相关一，如艾滋病、神经退行性疾

4、病和癌症。粟酒裂殖酵母是种优秀的研究线粒体遗传学和分子生物学的模式生物，并为研究各种细胞器和核一－个良好的载体线粒体的相互作用提供了。在本研究中，我们利用改进的庶糖梯度离也方法纯化了粟酒裂殖酵母线粒体，采取不去除小片段的方法提取了包括ｔＲＮＡ和小ＲＮＡ在内的所有线粒体ＲＮＡ，并且通过透射电镜和定量ＰＣＲ验证了线粒体ＲＮＡ的质量和纯度。结合高通量测序和传统的生物学实验方法，我们对粟酒裂殖酵母的线粒体转录组进行了全面分析。线粒体转录沮测序结果显示的ＲＮＡｓ的切割位点和基因的表达量差异表明转＾＂录后调控机制的存在ＣＲ－。我们确定了ｍ／、邮？６和ｔＲＮＡ的切割位

5、点，并通过Ｌ－ＺＥＬＡＣＲＴＰＣ民验证了测序数据的可信度。化与人的ｔＲＮａｓｅ（２腐度同源，而ＥＬＡＣ２基因与前列腺癌及艾滋病相关’。Ｔｒｚ２定位在线粒体，具有ｔＲＮＡ３末端加工酶活性。本研究中，我们全面分析了Ｔｒｚ２失活对线粒体ＲＮＡ加工和表达的影响，结果表明Ｔｒｚ２对于线粒体ｔＲＮＡｓ的３端的加工是必不可少胁并且Ｔｒｚ２的＇功能缺失也影响了线粒体ｍＲＮＡｓ和ｒＲＮＡｓ５端成熟体的加工。线粒体是调控细胞调亡的核也细胞器。我们发现髙表达Ｔｒｚ２导致酵母细胞出现调ｔ现象：ＤＡＰＩ染色发现高表达Ｔｒｚ２导致粟酒裂殖酵母出现细胞核破碎和Ａｎｎｅｘ－ＶＴ２染色质凝

6、聚；ｉｎ标记表明高表达ｒｚ引起细胞膜磯醋醜丝氨酸外翻，并且定量ＰＣＲ发现线粒体调亡激活因子ａ诉表达上调；线粒体巧光染料ＭｉｔｏＴｒａ浊ｅｒ染色发现０ＥＴｒｚ２菌株的线粒体发生断裂，并且通过罗丹明１２３染色发现细胞内累积了大量的活性氧。高表达Ｔｒｚ２引起的细胞调亡依赖其线粒体定位。在国内外的研究中尚未有Ｔｒｚ２调控细胞调亡的相关报道。一粟酒裂殖酵母是种优秀的模式生物，许多重要生物过程与人接近。因此，本文章希望通过利用裂殖薛母为模型研究Ｔｒｚ２调控的线粒体介导的调亡，本研Ｌ究为了解ｔＲＮａｓｅＺ及调亡相关疾病的发生机制和寻找新的疾病预防及治疗的策略提供新思路。

7、关键词，，Ｔｒｚ２，调亡：线粒体粟酒裂殖酵母ＩＡｂｓｔｒａｃｔＡｂｓｔｒａｃｔＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａａｒｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｒｇａｎｅｌｌｅｓｔｈａｔｈａｒｂｏｒａｒｅｄｕｃｅｄｇｅｎｏｍｅ．Ｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｉｍｐｌｉｃａｔｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｄｅｆｅｃｔｓｏｆｍｋｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｒｅｓｕｌｔｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆｓｅｖｅｒａ