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《用人胚肺二倍体细胞株产生干扰素.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、接加入,0.,置3700双倍体细胞株。I使终浓度达到01M上述细胞用含10%新出生或。水浴箱6小时灭活病毒然后用碳酸氢钠将胎牛血清(PB)S的MEMEagle培养液或..。。,:禅调至74~76最后加入稳定剂即可BME培养液培养试验分两组进行取7一取其中一部分与佐剂混合(氢氧化铝或油剂),10天的培养细胞按Hvalel等人所述的超。、:。:制成含佐剂的灭活疫苗二疫苗检验按诱导方法进行诱生干扰素试验甲组按。·过去所述方法作无菌试验和稳定性试验并100孙g/ml剂量用Poly(I)ly(C)处理细OP。,O,·。从同
2、批疫苗中取出一部分制成干燥制剂随胞37C作用1小时后弃去oPly()IoPly()C后将它们(液体疫苗和冻干疫苗)同时分置于加人含亚胺环己酮的生长液(浓度为4件g/0、OO,,,4022~25C和37C6个月于不同时间检ml)孵育4小时后再用终浓度为2拜g/ml。,。测疫苗效力在疫苗效力试验中还将5倍的放线菌素D处理细胞1小时然后弃去液,,,,0稀释的三种疫苗制剂(不含佐剂疫苗含油剂体洗涤细胞三次最后加入生长液置370,孵育24小,,一与含氢氧化铝佐剂疫苗)分别接种豚鼠随后时后收获培养液20℃冻存待。。,,用狂犬
3、病毒(DR19株)攻击以未接种疫苗检乙组试验步骤同甲组但最后加入液。。但经DR19病毒攻击之豚鼠为对照为维持液该组亚胺环己酮与放线菌素D均,结果表明未接种疫苗的对照组豚鼠经用无血清培养液稀释而且亚胺环己酮的使,。环g/ml。DR19株病毒攻击后死亡率达75%三种用浓度为10干扰素滴定在FL细胞50,,疫苗制剂的50%有效剂量(ED)无统计学上进行以VSV为攻击病毒按蚀斑减少。,0,。差异在稳定性试验中液体疫苗制剂在370法检测滴定单位均用参考单位表示,222O”:、中效力保持1月在~5C和4C中保持研究结果表明一
4、各二倍体细胞株产,,,一半年而冻干疫苗制剂在这三种温度中效生千扰素的能力不同以BANI5细胞株。,,,,,一38力都能保持半年另外BEI灭活曲线表明的产量最高达到10sooU/ml而Wl,8把BEI直接加入病毒悬液中(终浓度为和MRCS细胞株的产量很低分别为90U/.。。,31护PFUm,01M)只需个小时便能灭活>/l和950U/ml在两组对比中乙组干扰o.lml。,、病毒液的感染性素的滴度高于甲组二在用亚胺环己酮和,D处理细胞时,作者指出在该研究中共制备了57批疫放线菌素FBS的存在能明显,,,苗它们都通过了
5、无菌试验安全性试验和抑制干扰素的产生抑制程度取决于FBS的。。,效力试验这些结果证明用BEI制备的灭浓度反之在干扰素产生液(指最后加入。的生长液或培养液)中加入FBS括狂犬病毒疫苗是有效和安全的与乙烯亚则能促进干一、,;胺(El)相比较BEI也是一种稳定而价廉的扰素的产生三生长于MEM培养液中的,。细胞,BME试剂它的毒性也比El低些其干扰素产量高于那些生长于、〔玩rghiOPetal:JClinMieriol,A)ob液中的同株细胞四用牛血清白蛋白(BS.,,11(2):1201980(英文)替换FBS进行试验
6、发现用含01%BSA的培养液与用含2.5%FBS的序化新李成明摘本刊编样组校)培养液所得到。149用人胚肺二倍体细胞株产生千扰素的千扰素产量一样BSA的最佳使用浓度为0.05一0.2%。作者应用人胚肺二倍体细胞株进行产生,,干扰素的研究并对干扰素产生过程中牛血作者指出鉴于各二倍体细胞株的干扰。,清的影响作了探讨素产量不同故在实际工作中应选用高产量。,,HA一试验选用23株人胚肺二倍体细胞并以的二倍体细胞株就上述研究而言以NI。l一38和MRCS5细胞株最为适用另量BSA替W作为产生干扰素的标准人外用适代一277一
7、,,S是有效的而且这对调控干扰素产生和在同样的半连续感染系统以麻疹病毒B。作为诱生剂试验了其他三株类淋巴母细提纯干扰素有利acaea:eruno,十〔MhidHtlMiobiolmIml胞结果NC37和RajiTK株细胞也获得··,,,7,唱24(1):311980(英文)了相当量的千扰素效价为10和10U/。一序化新李成明摘本刊编辉组校〕ml而RajiTK株在这个系统中仅产生极少量的干扰素(效价10`·”U/ml)。150不同病毒感染类淋巴母细胞后病毒的作者结论,繁殖和千扰紊的产生指出在半连续的感染系统中用减毒
8、的麻疹本文报告用一种半连续感染系统,Nal检查病毒感染ova细胞是生产干扰素最适。用的方法类淋巴母细胞中病毒的繁殖和干扰素的诱。、ereroansHetal:Virol63生l(H在aNamva细胞中试验的病毒有麻疹rA比、、、34):317,19新城鸡瘟(NDV)仙台人副流感(n皿(/80(英文)、、型)西门利克森林(SFV)滤泡性口腔炎彭春高摘童葵塘校〕。,151奴卡
