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1、98年月中阁种荃第期异种D对胚胎发N育A的影响施履吉严缘昌张基增莫慧英陆雅琴中国科学院上海细胞生物学研究所摘要有平衡器之东方蝶螺的D和无平衡器之黑斑蛙NDA当分别注射至黑斑娃NA,的受精卵内时两者都能使受注射卵发育成的有些蜡蚌在左鳃盖上具有类似平衡器的突出物.,可以推论蟠蚌的类似平衡器的突出物既不是由于遗传转基于这些事实化,也不是平衡器的诱导而是DNA对胚胎发育的非特异性效应.,,黑斑蛙在蜡蚌阶段其口部附近有一对吸盘而东方蝶蝠幼体具有的不是吸盘而是一对平.,`,.衡器金鱼中同美西螺Aobl厂,口m召、xei朋。m一样在幼体阶段没有这种
2、相应的结构但,工,是童第周和牛满江l]J及道如果把两栖类DNA注射至金鱼受精卵内从这些卵发育成的幼鱼..,因为我们的工作正需要遗传标志中有些产生了平衡器我们对这发现很感兴趣本文报道了将黑斑蛙和东方蝶螺DNA两者分别注射至黑斑蛙受精卵内的实验.这些实验结果相当出.,DNA注射的效应人意料但可能有助于阐明一、材料与方法,.东方蝶鲸和黑斑蛙都从野外采集来的在用于实验前它们在实验室里已养了一些时日黑.,用斑蛙未受精卵为注射了脑下腺和孕酮后得到常规的方法使其受精东方蝶螟DNA按照armurIZJ.为了减少糖原含量,M的方法用整个生物体制备在提取
3、.,..DNA前先将动物饥饿多天提出的DNA分子平均长度约5okbA280/A、。为051一052二.黑斑蛙DNA,首先用15多柠檬酸分离肝细胞核,然后再按a从肝脏提取Mlrn盯的方法.,..制备DNA提出的DNA分子的平均长度大约1一kZb人斌A26。为。51左右.实t3〕验中所用的显微注射方法与以前的相同在受精卵翻转后到第一次分裂将出现前进.DNA,行注射每个卵所注射的体积为5毫微升至20毫微升相当于95微微克至380微微克...组织学观察用石蜡切片法组织用oBiun氏液固定并用HE常规染色二、结果DNA2725个黑斑蛙受精卵,8
4、我们用东方蝶螺总共注射了得到了个在左鳃盖上有一个,.I,l)类似平衡器突出物的鳅蚌其中有些如照片(图版所示这些突出物在长度和形态上稍本文于.1980年8月2日收到第:ADN1172i期2施履吉等异种对胚胎发育的影响,.I,1)它们所在的部位与东方蝶螺平衡器的不同对类似平衡器突出物的微有些不同(图版组织学观察显示它们与蝶螺平衡器有些相似.但是在显微结构上有两个方面与嵘螺平衡器不同:(l)有些类似平衡器突出物在顶部或侧旁有一小孔.嵘螺平衡器则没有这种孔;(2)如,在一些类似平衡器突出物的内部有由一薄层细胞围住或分界的小空腔(图显微摄影照片
5、所示.n),版真正的平衡器没有这种空腔DNA注射的结果来看,从蝶螺显而易见的是由注射产生的鳅蚌类似平衡器突出物不是.,真正平衡器但问题的实质不是这种突出物是否是真正平衡器而是蝶螟DNA是否特异地产生这些突出物.因而,在此地我们需要的是一个对照实验以排除DNA对胚胎发育的非特异,〔,,,性效应因为多年来我们一直知道有这种效应存在于是我们就将黑斑蛙DNA注射至黑斑.,蛙受精卵内我们共注射3376个卵得到3个在左鳃盖上有一个类似平衡器突出物的蛾蚌..I,2(图版)这些突出物在形态和组织学上都与注射蝶螺DNA实验组中所看到的相似从这些结果我们
6、可以结论为东方嵘螺DNA和黑斑蛙DNA当注射至黑斑蛙受精卵内时两者都能使一些蛾蚌在左鳃盖上有一个类似平衡器的突出物..,受注射卵的早期发育与以前所报道的相似5[J上述实验中三、讨论,我们的结果清楚地说明注射蝶螺DNA所得到的一些黑斑蛙娥蚌的类似平衡器突出物,DNA不是由于这种DNA特异性地产生的因为注射黑斑蛙也同样使得一些黑斑蛙蛾蚌有这.种结构当将这些结川,:果与童第周和牛满江在金鱼中所得到的比较时可看到有几个共同点(1),蛙中所看到的类似平衡器突出物的外部形态类似于金鱼中所看到的;(2)在这两种情况中由注射DNA所得到的有类似平衡器
7、突出物的鳅抖或幼鱼中每个都仅有一个这种突出物;(3),在蛙的例子中有平衡器之东方蝶螺的DNA和无平衡器而有吸盘之黑斑蛙的DNA两者都能使在正常无平衡器(而有吸盘)遗传组成的鳅蚌中有类似平衡器突出物出现.同样在金鱼的例,DNADNA子中有平衡器的加州螺和无平衡器的美西螺两者都使得遗传组成是无平衡器型的金鱼幼体有些具有类似平衡器突出物.然而在结果上这两者有一个明显的不同.在金鱼中,所看到的类似平衡器突出物或在左边或在右边而在蛙中所看到的突出物无例外地都在左鳃.,,:(l)金鱼的突出物是否是盖上然而为了全面地完成这种比较还需要弄清楚两点它们
8、是在鳃盖上;(2)金鱼的突出物是否有内部空腔.这些间题从童第周和牛满江川的文章的叙述中或照片上都不能得出答案.遗憾的是童第周和牛满江川没有把金鱼的DNA注射至金鱼的受精卵内作为对照.这样的注射是否也能产生类似平衡器突出物