丹芍颗粒Ⅲ号诱导Akt磷酸化在治疗大鼠紫癜性肾炎中的作用.pdf

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1、中华中医药杂志(原中国医药学报)2017年1月第32卷第1期CJTCMP,January2017,Vol.32,No.1�285�·研究报告·丹芍颗粒Ⅲ号诱导Akt磷酸化在治疗大鼠紫癜性肾炎中的作用11231付芸芸,袁斌,周立华,徐建亚,秦艳巧123(南京中医药大学附属医院,南京210029;南京中医药大学基础医学院,南京210029;南京中医药大学儿科研究所,南京210029)摘要:目的:探讨丹芍颗粒Ⅲ号对紫癜性肾炎(HSPN)大鼠的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为5组:空白组,模型组,丹芍低、中、高剂量组,各5只,造模后丹芍各剂量组给予丹芍颗粒Ⅲ号治疗,取肾组织后送病

2、理观察;BCA法进行大鼠24h尿蛋白定量;Westernblot法检测大鼠肾组织中p-Akt蛋白量;RT-PCR法检测大鼠肾组织AktmRNA的表达量;透射电子显微镜下观察肾小球基底膜及足细胞。结果:光镜下,模型组肾组织存在明显异常改变;丹芍各剂量组肾组织病变较模型组减轻。24h尿蛋白定量模型组显著高于空白组(P<0.05);丹芍高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05)。与空白组比,模型组p-Akt蛋白灰度值比率显著下降(P<0.01),与模型组比,丹芍高、中剂量组p-Akt蛋白比率均升高(P<0.05)。5组AktmRNA表达不等,但两两之间差异无统计学意义。空白组肾小球

3、基底膜清晰完整,足突未见融合,而模型组肾小球基底膜偶见增厚,但足突大部分融合,消失。丹芍各剂量组大鼠肾小球基底膜基本光滑均匀,足突融合较模型组明显减轻。结论:丹芍颗粒Ⅲ号诱导Akt蛋白的磷酸化,促进PI3K/Akt信号通路抑制肾小球足细胞融合、凋亡的作用,可能是发挥对大鼠HSPN治疗作用的机制。关键词:紫癜性肾炎;丹芍颗粒Ⅲ号;Akt;磷酸化;肾小球基底膜;足细胞;机制基金资助:江苏省自然科学基金项目(No.BK20141506)EffectsofDanshaoGranuleⅢinducingp-Aktsignaltransductionpathwayonthetreatmen

4、tofhenoch-schonleinpurpuranephritisrats11231FUYun-yun,YUANBin,ZHOULi-hua,XUJian-ya,QINYan-qiao12(AffiliatedHospitalofNanjingUniversityofTCM,Nanjing210029,China;BasicMedicalCollegeofNanjingUniversityof3ChineseMedicine,Nanjing210029,China;InstituteofPediatricsofChineseMedicine,NanjingUniversit

5、yofChineseMedicine,Nanjing210029,China)Abstract:Objective:ToinvestigatethemechanismunderlyingDanshaoGranuleIIItreatinghenoch-schonleinpurpuranephritis(HSPN)rats.Methods:SDmaleratswererandomlydividedinto5groups,thecontrolgroup,theHSPNgroupandtheDanshaoGranulegroupswithlow,middleandhighdosesre

6、spectively,5ratsineachgroup.Then,theDanshaoGranulegroupsweretreatedwithdifferentdosesofDanshaoGranuleIII.Thehistopathologicalchangesofthekidneytissuewereobserved.The24hurinaryproteinquantitywasdeterminedwithBCAmethod.Theproteinexpressionofp-AktwasdetectedbyWesternblot.ThemRNAexpressionofAktw

7、asdeterminedbyRT-PCR.Therenalglomerulusbasementmembraneandpodocytewereobservedwiththetransmissionelectronmicroscope.Results:ThepathologicalresultsshowedthatrenalinjurywassignificantlyobservedintheHSPNgroup,whichwasreservedbytheadministrationofDansh

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