黄曲霉毒素B1对非洲绿猴肾细胞的毒性效应及作用机制研究.pdf

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1、国际检验医学杂志２０１７年４月第３８卷第８期ＩｎｔＪＬａｂＭｅｄ，Ａｐｒｉｌ２０１７，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．８·１００９··论著·＊黄曲霉毒素Ｂ１对非洲绿猴肾细胞的毒性效应及作用机制研究刘珊１，罗仲秋２，范小明１，吴昊１，李明勇１，谭洪３△（１．电子科技大学附属医院／四川省医学科学院·四川省人民医院检验科，成都６１００７２；２．成都中医药大学医学技术学院，成都６１００３１；３．成都市第一人民医院／成都市中西医结合医院普外科６１００４１）摘要：目的探讨黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）对非洲绿猴肾细胞（ＶｅｒｏＥ６）的毒性效应及其作用

2、机制。方法体外培养ＶｅｒｏＥ６细胞，不同浓度ＡＦＢ１处理细胞后，采用ＣＣＫ－８法检测细胞存活率；检测乳酸盐脱氢酶（ＬＤＨ）释放率；利用ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ双染、ＤＡＰＩ染色研究细胞死亡机制。结果ＡＦＢ１对ＶｅｒｏＥ６细胞有显著毒性损伤效应，２００μｍｏｌ／ＬＡＦＢ１处理ＶｅｒｏＥ６细胞４８ｈ后，细胞存活率不到１０％。细胞ＬＤＨ释放率随着ＡＦＢ１浓度增加而显著升高。ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ染色检测到细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻。ＤＡＰＩ染色检测到细胞核碎裂。结论ＡＦＢ１对ＶｅｒｏＥ６细胞具有明显的毒性损伤作用，其可能通过凋亡的机制

3、引起细胞死亡。关键词：黄曲霉毒素Ｂ１；非洲绿猴肾细胞；细胞凋亡；细胞毒性ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１７．０８．００１文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２０１７）０８－１００９－０３ＣｙｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＡｆｌａｔｏｘｉｎｓＢ１ｏｎＶｅｒｏＥ６ｃｅｌｌｓ＊１，ＬＵＯＺｈｏｎｇｑｉｕ２，ＦＡＮＸｉａｏｍｉｎｇ１，ＷＵＨａｏ１，ＬＩＭｉｎｇｙｏｎｇ１，ＴＡＮＨｏｎｇ３△ＬＩＵＳｈａｎ（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ

4、，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／ＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１００７２，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴＣＭ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１００３１，Ｃｈｉｎａ；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌＳｕｒｇｅｒｙ，ＣｈｅｎｇｄｕＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏ

5、ｓｐｉｔａｌ／ＣｈｅｎｇｄｕＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴＣＭ＆ＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１００４１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｙｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＡｆｌａｔｏｘｉｎｓＢ１（ＡＦＢ１）ｏｎｔｈｅＡｆｒｉｃａｎｇｒｅｅｎｍｏｎｋｅｙｋｉｄｎｅｙｃｅｌｌｓ（ＶｅｒｏＥ６）．ＭｅｔｈｏｄｓＡｆｔｅｒｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｏｆＶｅｒｏＥ６ｃｅｌｌｓｗｉｔｈＡＦＢ１，ｃｅｌｌｕｌａｒｔｏｘｉｃｉｔｙｗａ

6、ｓａｓｓｅｓｓｅｄｂｙＣＣＫ－８ａｓｓａｙａｎｄＬＤＨｒｅｌｅａｓｅｒａｔｅ．ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩｄｏｕｂｌｅｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＤＡＰＩｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｅｄｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＡＦＢ１ｈａｓｓｉｇｎｉｆｉ－ｃａｎｔｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎＶｅｒｏＥ６ｃｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌｖｉａｂｉｌｉｔｙｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ１０％ｗｈｅｎｔｒｅａｔｅｄｂｙ２００μｍｏｌ／ＬＡＦＢ１ｆｏｒ４８ｈ．ＬＤＨｒｅｌｅａｓｅｒａｔｅｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｗｉｔ

7、ｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆＡＦＢ１ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｅｘｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｗａｓｏｂ－ｓｅｒｖｅｄｂｙＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩｄｏｕｂｌｅｓｔａｉｎｉｎｇ．ＮｕｃｌｅｕｓｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＤＡＰＩｓｔａｉｎｉｎｇ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡＦＢ１ｅｘｈｉｂｉｔｓｓｉｇｎｉｆｉ－ｃａｎｔｌｙｃｙｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎＶｅｒｏＥ６ｃｅｌｌｓｂｙｉｎｄｕｃｉｎｇｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａ

8、ｆｌａｔｏｘｉｎｓＢ１；ａｆｒｉｃａｎｇｒｅｅｎｍｏｎｋｅｙｋｉｄｎｅｙｃｅｌｌｓ；ｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ黄曲霉毒素主要是在粮食霉变过程中，由黄曲霉菌和寄生究ＡＦＢ１对人体毒性效应提供一定的参考。［１］。其中以黄曲霉毒素Ｂ１曲霉菌产生的毒性代谢产物１材料与方法（ＡＦＢ１）最