硒对黄曲霉毒素 B1暴露肉鸡肝脏氧化损伤的保护作用.pdf

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1、动物营养学报2014，26(8)：2281—2288ChineseJournalofAnimalNutritiondoi：10．3969／j．issn．1006-267x．2014．08．032硒对黄曲霉毒素Bl暴露肉鸡肝脏氧化损伤的保护作用芮小丽陈思潭李春梅(南京农业大学动物科技学院，南京210095)摘要：本试验旨在研究硒(Se)对黄曲霉毒素B(AFB)毒性的缓解作用及其可能机制。选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡90只，随机分为3组(每组3个重复，每个重复lO只)：基础饲粮组(对照组)、基础饲粮+100tx

2、g／kgAFBl组(AFBl组)、基础饲粮+100~g／kgAFB1+0．3mg／kgse组(se组)，试验期为42d。结果表明：1)与对照组相比，AFB组肉鸡肝脏重显著降低(P<0．05)；血清谷丙转氨酶活性显著升高(P<0．05)；肝脏丙二醛和过氧化氢含量显著升高(P<0．05)，总超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽含量和谷胱甘肽过氧物酶活性则显著降低(P<0．05)；肝脏组织病理切片观察到多处出血位点及肝细胞坏死和萎缩；免疫组织化学和蛋白质印迹分析发现核转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白在肝细胞核内表达显著

3、增加(P<0．05)，凋亡因子含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶一3(caspase一3)在AFB组胞核内表达。2)在100txg／kgAFB饲粮中加入se能在一定程度上缓解AFB引起的肉鸡肝功能紊乱和肝脏氧化应激损伤，并使肝细胞胞核Nrf2表达水平显著下降(P<0．05)。由此可见，se能够缓解AFB引起的肉鸡肝脏功能紊乱和氧化损伤，增加肉鸡抗氧化能力。关键词：AFB1；硒；肝脏；氧化应激；Nrf2；肉鸡中图分类号：$816．72；$831文献标识码：A文章编号：1OX>267X(2014)08-2281．08黄

4、曲霉毒素(aflatoxin，AF)是黄曲霉和寄生关因子2(Nrf2)是重要的调节因子，正常情况下，曲霉的次级代谢物，世界粮农组织对食用作物的Nrf2和细胞骨架相关蛋白Kelch样环氧氯丙烷相污染情况进行了估计，发现在约25％受真菌毒素关蛋白一l(Kelch—likeECH-associatedproteinl，污染的作物中，AF污染最为严重J。美国农业经Keap1)以二聚体的形式存在于细胞质中，维持细济学家统计，AF污染的饲料每年至少要使美国畜胞的酶类和抗氧化物处于基础表达水平，使细胞牧业遭受10％的经济损失

5、J。目前，已发现的AF处于稳定状态[9-10]。氧化应激源作用下，Nrf2与约20种，其中黄曲霉毒素B(AFB)因毒性最强、Keapl解偶连后转移入核，与抗氧化反应元件(an—tioxidantresponseelement，ARE)上位点结合，启动分布最广、危害最大而被列入一级致癌物j。同ARE调控的Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶基因表达，增时，AFB也是最有潜力的细胞毒性物质，它进入加细胞对氧化应激的抗性。机体产生活性氧簇(ROS)从而引起氧化应激反硒(Se)是机体必需的微量元素，也是一种有应[4-s]，造成慢性或急

6、性中毒，最终导致畸形、突变效的抗氧化剂，它能够清除体内代谢产生的氧自和癌症的发生-o。由基离子等，保护细胞膜及细胞器膜免受氧自由在机体抗氧化应激过程中，核转录因子E2相收稿日期：2014—03—03基金项目：江苏省高等学校大学生实践创新训练计划(1310307018x)；青蓝工程作者简介：芮小丽(1988一)，女，安徽马鞍山人，硕士研究生，动物营养与饲料科学专业。E—mail：ruixiaoli1988@163．com}通讯作者：李春梅，博士生导师，E-mail：chunmeili@njau．edu．cn动物营

7、养学报26卷基的干扰和损害。关于se用于AF毒性缓解(AFB含量小于国家饲料卫生标准GBl3078—的报道3。H已有很多，但其作用机制鲜有研究。2001规定，Se含量为0．1mg／kg)，其为参照NRC为此，本试验以爱拔益加(AA)肉鸡为试验对象，(1994)营养需要配制的粉状配合饲料，基础饲粮旨在研究se对AFB引起肉鸡肝脏毒性损伤的保组成及营养水平见表1。AFB组饲喂在基础饲粮护及其可能作用机制，为se更有效的利用提供科中添加100Ixg／kgAFB的试验饲粮(AFB添加学依据。量参考文献[15])，Se组

8、饲喂在AFB组饲粮中添加0．3mg／kgSe的试验饲粮(se添加量参考文献1材料与方法[13，l6])，Se以亚硒酸钠(NaSeO。)的形式添加。1．1试验设计试验期为42d，其中，l一21日龄饲喂前期料，22～选用1日龄AA肉鸡90羽，随机分为3组，每42日龄饲喂后期料。肉仔鸡自由采食，充足饮水，组3个重复，每个重复10只，公母各占1／2，初始常规免疫。体重差异不显著(P>0．05)