鬼伞属真菌的杀线虫活性 优先出版.pdf

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1、化学与生物工程２０１７，Ｖｏｌ．３４Ｎｏ．０４ｗｗｗ．ｈｘｙｓｗｇｃ．ｃｏｍ１９Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１７．０４．００５丁正蛟，孟帅，刘亚君．鬼伞属真菌的杀线虫活性［Ｊ］．化学与生物工程，２０１７，３４（４）：１９－２０，２７．鬼伞属真菌的杀线虫活性丁正蛟，孟帅，刘亚君＊（云南大学云南生物资源保护与利用国家重点实验室，云南昆明６５００９１）摘要：研究了１０种鬼伞属真菌对全齿复活线虫的毒杀活性，并用ＨＰＬＣ法分析了杀线虫毒素在各真菌中的

2、分布。结果表明，有７种鬼伞属真菌表现出明显的杀线虫活性，且杀线虫活性与其杀线虫毒素的分布呈正相关。关键词：鬼伞属；杀线虫活性；杀线虫毒素中图分类号：Ｑ９３９文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－５４２５（２０１７）０４－００１９－０２ＮｅｍａｔｉｃｉｄａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｏｐｒｉｎｕｓＦｕｎｇｉ＊ＤＩＮＧＺｈｅｎｇ－ｊｉａｏ，ＭＥＮＧＳｈｕａｉ，ＬＩＵＹａ－ｊｕｎ（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｉｏ－ＲｅｓｏｕｒｃｅｉｎＹｕｎｎａｎ，ＹｕｎｎａｎＵｎ

3、ｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５００９１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＮｅｍａｔｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｔｅｎｋｉｎｄｓｏｆＣｏｐｒｉｎｕｓｆｕｎｇｉａｇａｉｎｓｔＰａｎａｇｒｅｌｌｕｓｒｅｄｉｖｉｖｕｓｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．ＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｎｅｍａｔｏｔｏｘｉｎｉｎｖａｒｉｏｕｓｆｕｎｇｉｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔ，ｓｅｖｅｎｋｉｎｄｓｏｆＣｏｐ－ｒｉｎｕｓｆｕｎｇｉｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｎｅｍａｔｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｙ

4、，ａｎｄｔｈｅｎｅｍａｔｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｄｉｓｔｒｉ－ｂｕｔｉｏｎｏｆｎｅｍａｔｏｔｏｘｉｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｏｐｒｉｎｕｓ；ｎｅｍａｔｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；ｎｅｍａｔｏｔｏｘｉｎ迄今为止，已发现约２１属９０多种担子菌可以捕菌分别接种于马铃薯葡萄糖培养基（直径９ｃｍ培养平［１］食线虫。Ｌｕｏ等报道毛头鬼伞（Ｃ．ｃｏｍａｔｕｓ）可以捕板）上，２２℃静置培养１２ｄ，提取代谢物。每种真菌做杀全齿复活线虫（Ｐａｎａｇｒｅｌｌｕｓｒｅｄｉｖｉｖｕｓ）和根结线３个平

5、行。虫。研究发现，鬼伞属真菌的杀线虫活性与杀线虫毒１．２代谢物的提取［２］。作者［３］素密切相关，毛头鬼伞含有多种杀线虫毒素代谢物的提取参照Ｓｍｅｄｓｇａａｒｄ和Ａｎｄｅｒｓｅｎ［４］在此研究了１０种鬼伞属真菌对全齿复活线虫的毒杀等建立的微萃取法并加以改进。用１００ｍＬ氯仿－活性，测定了杀线虫毒素的分布，建立了每种真菌的代甲醇（１∶１，体积比）浸提１０种真菌培养物；然后用谢物ＨＰＬＣ图谱，构建了化学成分相似性聚类树，以１００ｍＬ乙酸乙酯萃取残余物，最后用１００ｍＬ丙醇萃期找到代谢物和杀线虫活性之间的相关性，为深入研取；合

6、并所有萃取物，减压蒸发溶剂，干燥，得代谢提取物。究鬼伞属真菌的杀线虫活性提供帮助。１．３代谢物化学成分的测定将干燥的代谢提取物溶解于１ｍＬ甲醇中，经１实验０．４５μｍ滤膜过滤，以从毛头鬼伞中分离的一系列杀１．１真菌的培养线虫毒素作为外标，采用ＨＰＬＣ法测定代谢物的化学１０种鬼伞属真菌均保藏于云南生物资源保护与成分。利用国家重点实验室的培养物保藏中心。将１０种真ＨＰＬＣ色谱条件：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００系统（Ａｇｉｌｅｎｔ，基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０８６０００９，３１２６０４４６）收稿日期：２０１６－１１－２２

7、作者简介：丁正蛟（１９９２－），男，云南曲靖人，硕士研究生，研究方向：植物保护，Ｅ－ｍａｉｌ：５２６５４３７７７＠ｑｑ．ｃｏｍ；通讯作者：刘亚君，副研究员，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｊ＠ｙｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。２０丁正蛟等：鬼伞属真菌的杀线虫活性／２０１７年第４期ＵＳＡ），ＳＢ－Ｃ１８色谱柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ，Ａｇｉ－２．２鬼伞属真菌杀线虫毒素的分布ｌｅｎｔ，ＵＳＡ），ＤＡＤ检测器全扫描，５％～１００％乙腈线从毛头鬼伞中分离得到的７种杀线虫毒素（Ⅰ～性梯度洗脱，流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，６０ｍｉｎ。所用化学Ⅶ）在１

8、０种鬼伞属真菌中的分布情况如表２所示。品均为Ｍｅｒｃｋ公司ＨＰＬＣ级，水为双蒸水。表２杀线虫毒素在１０种鬼伞属真菌中的分布１．４杀线虫活性的测定Ｔａｂ．２Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｎｅｍａｔｏｔｏｘｉｎ将全齿复活线虫置于燕麦片培养基（燕麦片２０ｇｉｎｔｅｎｋｉｎｄｓｏｆＣｏｐｒｉｎｕｓｆｕｎｇｉ＋水８０ｍＬ）上于２