AKTA蛋白纯化仪.ppt

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1、快速蛋白液相色谱系统AKTAFPLC(明道楼811)林彦2009.4.16仪器组成P-920pumpUPC-900detectorFRAC-920fractioncollector主要技术指标泵系统全自动双泵系统，流速精度高，梯度重复性高，可完成自动缓冲液配置。宽广的流速范围同时满足实验室研究及中试制备应用。①流速范围：0.05-20mL/min（梯度）②压力范围：0-5MPa，50bar,725psi③压力传感器：0-5Mpa,Offseterror:<0.05Mpa,Scaleerror:<±2%④压力监控：由UNICORN软

2、件在线监控⑤梯度生成：高压梯度混合提高了分辨率，准确性和重复性，带压力传感器和过压报警功能⑥梯度精度：reproducibility:<1%Bat300±50nl/min⑦延迟体积：<600µl/moduleUV检测器①UV检测波长：254nm，280nm②线性：254nm时高至2AU为小于3％，280nm时高至1AU为小于5％③基线调整：全范围0-100%可调④噪音：40 × 10-6 AU⑤漂移：<100 × 10-4 AU电导检测①流动池死体积：200nL，②电导范围：1mS/cmto999.9mS/cm，

3、③精确性：0.1mS/cm，④重复性：Max.±3%or±15mS/cm，功能/应用范围可以快速的检测、分离、纯化多种生物样品（蛋白质、多糖、生物酸、生物碱以及天然小分子等），能够有效地针对各种样品：植物、动物、人类生物体，纯化、分离特异性生物小分子。适合实验室摸索等小规模生产。基本原理溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，进而达到分离的效果。凝胶过滤：根据分子大小和形状进行分离。分子量较大的先出峰，小的后出峰。离子交换色谱：由于静电相互作用而使样品结

4、合到凝胶上，再采用盐浓度梯度或者更换缓冲液的PH值进行洗脱。对于等电点小于5.0的酸性蛋白质，推荐使用阴离子交换，对于等电点大于7.0的碱性蛋白质，推荐使用阳离子交换。疏水作用色谱：利用蛋白质、多肽在高盐存在下，可以结合疏水凝胶，而在盐浓度降低时又可以解脱的原理实现分离。亲和层析色谱：利用蛋白质、多肽与某些配基的特异性相互作用而进行分离。例如：酶-底物，酶-抑制剂，糖蛋白-凝集素，抗原-抗体等。常用层析方法Thankyou