放射免疫分析.ppt

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1、放射免疫分析Radioimmunoassay一、原理：Ag+AbAgAb+Ag+*Ag*AgAb+*Ag*Ag和Ab量恒定竞争结合++++6—8X100=75%X100=50%X100=25%X100=12.5%8—4—828—1结论*AgAb复合物的量取决于Ag的量Ag量越大，*AgAb量越少Ag量越小，*AgAb量越大测量*AgAb量或测量多余*Ag量可推算出Ag量二、测量步骤恒量的*Ag、Ab加入反应管中加入待测样品、或标准品（已知浓度）37℃或4℃温育加入分离剂分离结合及游离部分测定以总放射性为分母，测定*A

2、gAb为分子，计算结合%，以结合率为纵坐标，浓度为坐标，制作标准曲线待测样品的结合率从标准曲线上求出浓度02481632641288070605040302010结合%浓度三、放免分析基本条件标准品标记抗原特异抗体分离剂——分离结合与游离部分分离剂要求快速而完全分离操作简便、来源容易、价格便宜不受血清、外界条件及其它试剂的干扰适用于任何容积的反应液非特异结合率小常用液相分离技术双抗体法特点：分离完全，非特异结合小，环境影响小，效价高，但成本高沉淀法聚乙二醇（w=6000）特点：快速，价廉，来源方便，受环境影响大常用液

3、相分离技术（续）吸附法吸附游离部分，适用于分离小分子游离抗原。活性炭、纤维素粉末特点快速、简便、准确性差盐析法饱和硫酸胺、硫酸钠固相分离技术，按材料不同，可分为试管法、颗粒法、小盘法、纸片法四、放免分析的优点灵敏度高特异性强精确度高用血量少体外测量单位换算1g=1000mg1mg=1000µg1µg=1000ng1ng=1000pg非放射性体外分析技术非同位素标记的条件灵敏度结合特性均一性稳定性环境因素的不敏感性临床应用安全性应用性非放射性体外分析技术酶免疫分析发光免疫分析化学发光免疫分析酶放大化学发光免疫分析电化学

4、放光免疫分析荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析或解离增强镧系荧光免疫分析BCPDA强荧光螯合物的时间分辨荧光免疫分析酶促放荧光免疫分析微粒子酶荧光免疫分析荧光偏振免疫分析金属离子免疫分析