《放射免疫分析质控》PPT课件

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1、放射免疫分析的 质控与临床应用河北医科大学第三医院黄建敏1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析,并因此在1977年获得了诺贝尔医学奖!相关管理规则自70年代起,放免技术广泛应用为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售,我国在1989年4月颁布了<<放射性药品管理办法>>,1995年12卫生部药政局颁布了<<放射免疫分析药盒通则>>同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规范,各地也出台了相应的质控手册等浙江省核医学中心:1993年2月浙江省核医学中心成立,负责全省核医学技术指导、培训核医学从业人员(

2、核医学上岗培训及在岗培训)及全省核医学质量控制、管理等工作。主要内容误差的种类产生误差的主要原因和控制方法内部质量评价外部质量评价放射免疫分析的临床应用误差系统误差随机误差可以避免不可避免可以控制用于评价系统误差的指标称为偏倚(bias),而在体外放射分析中更多的使用准确度(accuracy),是指:测定值与真值的一致程度评价随机误差的指标称为精密度(precision),指在一定条件下,由一种实验方法对某一样品多次重复检测时所得结果的一致性产生误差的主要原因误差ADGEB玻璃容器加样器具仪器和设备解释及评价生物样品的制备操作C

3、F试剂数据处理1.仪器和设备对误差的影响放射性探测仪离心机混匀器关于放射性探测仪应注意一下几点仪器是否在最佳公作条件下工作,例:用测131I的条件测125I就不妥测量的误差:样品的放射性活度过低,则使误差增大;本底同样对测量结果产生影响生物样品也是引进误差的常见原因:例:对于能量较低的125I来说,管壁的自吸收现象离心机的使用一般的离心机只通过转速来表示工作状态,而忽略了半径对离心力的影响,因此建议将每分钟转速转换为相对离心力,其公式为:RCF=0.00001118×R×N2温度同样会对离心产生影响一般控制在40C为宜混匀器使用

4、混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混匀,应加注意的是防止将溶液溅出管外造成损失,引起误差质量控制样品:实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现象并不少见,这样会使样品测定值发生变化而难以觉察其它试剂:例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓冲液,其质量是否合格?2.玻璃容器及加样器具对误差的影响由于体外放射分析是微量操作技术,所以所使用的移液枪除应校准其容量外,还应观察其气密程度;而操作中更应注意其正确的排液方式及是否存在气泡的影响3.试剂对误差的影响标准品:不同的试剂盒对标准品的组装方案不同,应认真区分并尽量取样准确

5、,例,类固醇激素只能用选定的稀释液来稀释标记物:随时间延长,应考虑到放射元素的脱标和物理衰变的影响,而放射性浓度较高则可能因“衰变损伤”导致配体分子免疫活性下降结合剂:保存不当是使结合剂质量下降的主要原因,因此“不能反复冻融;一旦稀释,一次性使用”分离剂:足量以供在一定时期内连续使用,如需更换,必须鉴定,因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别4.生物样品的采集与制备生物样品的采集应注意以下几点:体位:例:对血浆肾素活性测定的影响饮食:例:对基础胰岛素水平的影响时间:例:昼夜对对皮质醇和ACTH的影响机体状态:例:应激对皮质醇

6、和ACTH的影响性别.年龄.月经周期:例:对性激素水平的影响药物:例:氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响生物样品的制备:目的:适于检测方法的需要而同时保存分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化例如:是否需要抗凝?用何种抗凝剂?不能马上检测是否需要离心?保存的温度如何?避免溶血!等等!5.操作操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因,其中加样环节尤其重要!加样速度是否均一,移液枪的使用是否规范?所用容器等是否清洁或受到污染?离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等6.数据处理关于

7、标准曲线拟合方式的选择:虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系,但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系统,因此,需要去选择!LogitY=a+b·logX优点:常用、计算简单、使用方便缺点:有一定的偏离,特别是线性两端3/2次方曲线回归或logitY=a+b·logX+c(logX)2+d(logX)3优点:真实性强缺点:计算复杂,不易发现并舍弃坏点WHO推荐四参数logistic法其适应性强,但计算复杂但目前的放射免疫分析系统自带的软件能够对拟合方式作出最佳的选择!7.解释和评价单位的统一:最好使用国际制单位并统一

8、起来正常值及正常范围:各实验室应该建立自己的正常值及正常范围,借用文献或以往的数据不可取,因为抽样群体的差别和检测技术的不同,都可能会影响到正常值及正常范围。建立自己的正常值和正常范围时也应注意两点:1受检人群是否健康2受检人群样本含量大小内部质量控制主要是探讨

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