生物实验1 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定.ppt

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1、实验一生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中某些化合物能与相应化学试剂产生特定的颜色反应。还原糖＋斐林试剂砖红色沉淀脂肪＋蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色1．还原糖的鉴定(注：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后立即使用)结论：还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。2．脂肪的鉴定取材；花生种子(浸泡3～4h)将子叶削成薄片制片观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色3．蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：卵清或黄豆(浸泡1～2d)结论：生物组织中含有蛋白质1．斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分0.1g/mLN

2、aOH溶液0.05g/mLCuSO4溶液0.1g/mLNaOH溶液0.01g/mLCuSO4溶液鉴定物质还原糖蛋白质添加顺序甲乙两液等量混匀后立即使用先加入A液1mL，摇匀，再加入B液4滴，摇匀反应条件水浴加热不需加热，摇匀即可反应现象样液变砖红色样液变紫色2.在鉴定还原性糖的实验中，对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部，另外，试管口不要朝向实验者，以免沸腾的溶液冲出试管，造成烫伤。3．虽然本实验是验证性实验，但也要注意对照，在鉴定还原糖和蛋白质时留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对照，这样可以增强说服力。4．因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色Cu(OH)2沉淀所以应将

3、甲液与乙液分别配制储存，使用时再临时配制。若先加入NaOH，还原糖中的半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入CuSO4后不能产生砖红色的Cu2O沉淀，只有将其先配制成Cu(OH)2溶液，才能产生砖红色的沉淀。5．使用双缩脲试剂时要先加入双缩脲试剂A，造成碱性环境，而只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Cu2＋发生颜色反应。若加入过量的双缩脲试剂B，CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。6．在蛋白质的鉴定实验中，若用蛋白清作实验材料，必须稀释，以免实验后粘住试管，不易洗刷。