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1、2020新亮剑高考总复习课时2微生物的培养和分离第十一单元生物技术实践目录CONTENTS磨剑:课前自学悟剑:课堂精讲3磨剑:课前自学悟剑:课堂精讲磨剑:课前自学易错警示目标导航考点清单目录学科素养课程标准学习指导1.生命观念:能从细胞水平认识生物体的结构与功能是相适应的,生物的适应性是长期进化的结果。2.科学思维:通过研究培养基对微生物的选择作用,从不同的生命现象中,基于事实和证据,运用归纳的方法概括出生物学规律。3.科学探究:设计分离微生物的实验,针对日常生活的真实情境提出清晰的、有价值的、可探究的生命科学问题或可达成
2、的工程学需求。4.社会责任:关注微生物在生产生活中的应用;能通过科学实践,尝试解决现实生活中的生物学问题。1.进行微生物的培养和分离。2.测定某种微生物的数量。3.研究培养基对微生物的选择作用。4.探讨微生物的利用。5.尝试利用微生物进行发酵来生产特定的产物。备考中要加强微生物的实验室培养技术、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用等的记忆和理解,特别是关于微生物的培养和分离、计数及鉴定方面的应用,注意微生物培养过程中无菌操作的方法和原理,掌握微生物培养与计数的方法,记住尿素分解菌和纤维素分解菌的鉴定方法等。考
3、点1微生物的培养和分离1.培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。(3)种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。2.无菌技术常用方法3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。4.纯化大肠杆菌的方法(1)平板划线法:通过接种环在琼脂固体培
4、养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(2)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。5.菌种的保存方法(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。考点2某种微生物数量的测定1.统计原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数项目内容实验原
5、理①能合成脲酶的细菌才能分解尿素;②配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌数量统计①直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板);②间接计数法:稀释涂布平板法实验流程土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数(1)统计菌落数目一般用稀释涂布平板法。(2)统计菌落数目时,培养基表面生长的1个菌落,来源于样品稀释液中的1个活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。(3)从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算公式:每克样品中的菌落数=
6、(平均菌落数÷涂布的稀释液体积)×稀释倍数。(4)设置重复组,增强实验的说服力与准确性。考点3培养基对微生物的选择作用(1)原则:人为提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)目的:在培养基上形成的由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落。2.纤维素分解菌的分离(1)方法:刚果红染色法。(2)注意:纤维素酶是一种复合酶,它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,其作用如下:(3)标志:使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基,根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(4)操作流程土壤取样:富含纤维素的环境↓选择培养
7、:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌的数量↓梯度稀释↓涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生透明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈1.易混淆选择培养基与鉴别培养基(1)选择培养基允许特定的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长。如土壤中分解尿素的细菌的分离利用的是选择培养基。(2)鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物
8、与其他微生物区分开来的培养基。用于筛选纤维素分解菌的培养基就是鉴别培养基。2.易混淆分离和计数所用的方法(1)平板划线法:只能分离,不能计数。(2)稀释涂布平板法:既能分离,也能计数。13悟剑:课堂精讲真题体验体系构建考点巧讲磨剑:课前自学悟剑:课堂精讲目录考点1微生物的分离和培养1.培养基的配制原则(