课题1、菊花的组织培养.ppt

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1、专题3植物组织培养技术课题1、菊花的组织培养组织培养营养繁殖在初中的生物学习中，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？扦插嫁接压条扦插嫁接压条压条植物组织培养简介植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养一、植物组织培养的基本过程植物组织培养的原理是什么？植物细胞具有全能性，即已分

2、化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能。思考植物组织培养细胞离体①必要条件：一定的营养物质、激素和其他外界条件②原理:细胞的全能性从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官③外植体:离体的植物器官、组织、细胞愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养的基本过程外植体脱分化植物体外植体愈伤组织二、影响植物组织培养的因素不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同1.外植体的选取大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等2.培

3、养基的配制(MS培养基)MS固体培养基成分及比例微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文，思考以下问题同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素，后使用生长素同时使用有利于细胞分裂，但细胞不分化细胞既分裂也分化分化频率提高3.植物激素低：利于芽的分化，抑制根的形成适中：促进愈伤组织的生长高：利于根的分化，抑制芽的形成生长素/细胞分裂素3.植物激素高利于根的分化，抑制芽的形成适中促进愈伤组

4、织的生长思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？生长素/细胞分裂素植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为微生物提供了适合的营养。在这种培养基上，微生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们生长、繁殖得更快，而且会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。4.消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：菊花：pH=5.8温度控制在18—22℃每日光照12h5.pH、温度、光照制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上三、实验操作此时的组织或细胞是离体的，不能体现其整个植

5、物体的光能自养,细胞所生活的环境必需是液体有机物的营养环境。1.高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？思考培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。2.培养过程中为什么需要进行光照？思考思考①培养基的灭菌　　（高压蒸汽灭菌）②外植体的消毒　　（酒精、氯化汞）③接种时无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）④无菌箱中培养；⑤移栽到消过毒的环境中生存一段时间。3.在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？植物组织培养过程示意图上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌

6、处理，试管也没有做密封等。结果分析与评价指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。一、污染的定义二、污染原因1.细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌2.真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子。接种后3－10天才能发现。主要是霉菌污染。正常苗污染苗1.外植体带菌2.培养基及接种器具灭菌不彻底3.接种操作时带入4.环境不清洁三、污染途径（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁四、

7、污染的预防措施（一）防止外植体带菌1.选择好外植体采集时期和采集部位外植体采集以春秋为宜优先选择地上部分作为外植体阴雨天勿采，晴天下午采采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋2.室内或无菌条件下进行预培养（一）防止外植体带菌3.外植体消毒（一）防止外植体带菌1.分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口2.检查封口膜是否有破损（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌3.扎瓶口要位置适当、松紧适宜4.保证灭菌时间和高压灭菌锅内温度（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌5.接种工具用前彻底灭菌6.工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌（四）保证