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时间:2020-01-22
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1、第八章糖类物质的测定第一节概述(一)定义和分类碳水化合物统称为糖类,是由碳、氢、氧三种元素组成的一大类化合物。糖+蛋白质→糖蛋白糖+脂肪→糖脂①碳水化合物存在于各种食品的原料中(特别是植物性原料中)。②作为食品工业的主要原料和辅助材料。③在各种食品中存在形式和含量不一。糖分为单糖、双糖、多糖。有效碳水化合物——人体能消化利用的单糖、双糖、多糖中的淀粉。无效碳水化合物——多糖中的纤维素、半纤维素、果胶等不能被人体消化利用的。这些无效碳水化合物能促进肠道蠕动。四、食品中糖类物质的测定方法:相对密度法折光法旋光法物理法①
2、物理法②化学法③色谱法⑤发酵法④酶法⑥重量法直接滴定法法(改良的兰—爱农法)高锰酸钾法萨氏法3,5—二硝基水杨酸酚—硫酸法蒽酮法半胱氨酸—咔唑法化学法还原糖法碘量法比色法纸色谱薄层色谱GCHPLCβ—半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖葡萄糖氧化酶测葡萄糖发酵法——测不可发酵糖重量法——测果胶、纤维素、膳食纤维素色谱法酶法第二节可溶性糖类的测定一、可溶性糖类的提取和澄清食品中可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖及蔗糖等低聚糖。一般须将样品磨碎、浸渍成溶液(提取液),经过滤后再测定。(一)提取1.常用的提取剂有水及乙醇溶液
3、。2.提取液制备的原则⑴取样量与稀释倍数的确定,使(0.5—3.5mg/ml)。⑵含脂肪的食品,须经脱脂后再用水提取。⑶含有大量淀粉、糊精及蛋白质的食品,用乙醇溶液提取。⑷含酒精和二氧化碳的液体样品,应先除酒精、CO2。⑸提取过程如用水提取,还要加入HgCl2,防低聚糖被酶水解。中性醋酸铅【Pb(CH3COO)2·3H2O】乙酸锌和亚铁氢化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭等。(二)提取液的澄清1.常用澄清剂要符合三点要求2.常用澄清剂的种类3.澄清剂的用量用量必须适当,太少,达不到澄清
4、的目的,太多,会使分析结果产生误差。一般先向样液中加入1~3ml澄清剂,充分混合后静置。二、还原糖的测定根据糖分的还原性的测定方法叫还原糖法。(一)碱性铜盐法㈠直接滴定法(是GB法)(1)原理:将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀;这种沉淀很快与酒石酸钾反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用样液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀;这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物;二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲
5、基蓝还原,溶液由兰色变为无色,即为滴定终点;根据样液消耗量可计算出还原糖含量。Cu2++还原糖Cu+计算还原糖的量有两种方法:1.用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法。2.利用通过实验编制出的还原糖检索表来计算。在测定过程中要严格遵守标定或制表时所规定的操作条件,如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。(2)适用范围及特点本法又称快速法,它是在蓝一爱农容量法基础上发展起来的,其特点是试剂用量少,操作和计算都比较简便、快速,滴定终点明显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等样品时,因
6、色素干扰,滴定终点常常模糊不清,影响准确性。本法是国家标准分析方法。(3)说明与讨论①碱性酒石酸铜甲液:硫酸铜+次甲基蓝.②碱性酒石酸铜乙液:酒石酸钾钠+NaOH+亚铁氰化钾③乙酸锌溶液④亚铁氰化钾溶液⑤葡萄糖标准溶液:准确称取经98~100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后移入1000m1容量瓶中,加入5m1盐酸(防止微生物生长)。澄清剂⑥测定方法样品处理取适量样品,按本章第二节中的原则对样品进行提取,提取液移入250m1容量瓶中,慢慢加入5m1乙酸锌溶液和5m1亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,摇匀后静置30分钟。
7、用于燥滤纸过滤,弃初滤液,收集滤液备用。碱性酒石酸铜溶液的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液,加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒钟,趁热以每2秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次,取其平均值。m1=ρ×VF——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量,mg;ρ——葡萄糖标准溶液的浓度,mg/ml;V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,ml。也
8、可不标定,直接查表求ρ值。样品溶液预测吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00ml,置于250m1锥形瓶中,加水10ml.加玻璃珠3粒,加热使其在2分钟内至沸,准确沸腾30秒钟,趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液,滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时.以每2秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。样品溶液测定吸
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