血清肌酐(Cr或Cre)的测定.ppt

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1、血清肌酐(Cr或Cre)的测定余留海2013.12.03血清肌酐(Cr或Cre)的测定(不去蛋白终点法)ReagentforCreatinineTest一、原理二、测定方法三、参考值四、临床意义五、注意事项六、方法学评价七、小结一、原理肌酐是肌酸代谢的最终产物,由肾脏排出。人体内的肌酸,一部分来自食物、一部分来自体内合成。体内合成肌酐的原料为甘氨酸、精氨酸和蛋氨酸。样品中肌酐与碱性苦味酸作用,生成橙红色的苦味酸肌酐复合物,其颜色强度与样品中肌酐含量正比,与经过同样处理的肌酐校准液进行比较,即可计算出样品中肌酐的含量。根据肌酐

2、与苦味酸反应生成橙红色苦味酸肌酐复合物的速度与假肌酐不同,而设置适宜的检测时间。在20~80s之间,肌酐反应占绝对优势,80s后其他多数干扰物才有较快的反应,故而选择25~60s的反应速率来反映真肌酐的含量。而对假肌酐显色的干扰,可以通过选择真肌酐的最大吸收峰(波长)的确定来进行有效的规避。二、测定步骤:1、加样:各管分别混匀,置37℃恒温10分钟,510nm波长,以空白管调零,在10分钟内完成各管吸光度的测定。试剂(ml)测定(u1)校准(S)空白(B)样品0.10——校准液—0.10—蒸馏水——0.10工作液1.001.

3、001.002、计算计算公式:样品Cr含量(mmol/L)=×Cs注:肌酐校准液浓度122μmol/L三、参考值男性:44.2~132.6μmol/L女性:71.1~106.1μmol/L四、临床意义血液肌酐经肾小球过滤,肾小管既不重吸收,也不分泌,即肾对肌酐的排泄能力强,因而肾疾病早期血浆肌酐通常不高,在反映肾小球滤过率下降方面,血肌酐比血尿素的灵敏度低。但血肌酐受饮食、运动、激素、蛋白质代谢等因素的影响较少,所以诊断特异性比血尿素好。1.增高血肌酐增高:由于肾脏储备和代偿能力很强,故早期或轻度肾小球滤过功能受损时,血肌酐

4、正常。只有当肾小球滤过功能降至正常人1/3时,血肌酐才明显增高,故不能反映早期肾功能受损,对晚期肾病临床意义较大。与BUN同时测定意义更大,二者同时升高,说明肾功能严重受损,当Cr>200μmol/L,提示病情继续恶化,有发展为尿毒症的趋势;当Cr>400μmol/L则预后较差。如仅BUN升高,而Cr正常,则可能为肾外因素引起,如消化道出血或尿路梗阻。2、降低血肌酐减少,主要见于进行性肌肉萎缩、贫血、白血病等。五、注意事项1、必须严格控制反应时间,以尽量避免快速或慢反应假肌酐物质的干扰。2、本方法不宜用血浆标本。3、溶血产生

5、的红细胞内非特异性物质将干扰反应,应作血清空白(0.1ml血清+生理盐水1.00ml)。六、方法学评价1、线性范围:0.6~500μmol/L2、精密度:批内CV≤8.3%、批间极差≤10.2%3、准确度:≥90%4、空白吸光度:空白管在510nm波长处,10mm光径下,以蒸馏水调零,吸光度值≤0.150。小结谢谢!

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