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1、解放军医学杂志孟980年第5卷第6期血清肌醉简易微量测定法崔宝印.。,,,目前血清肌醉的测定多采用钨酸除蛋以0olNHcl稀释至刻度可于室温保存、,,,二方法白后碱性苦味酸显色法该法用血清量较大。,、操作也较烦琐近些年来已有血清不除蛋白测取小试管3支分别标明测定标准及空,。3〕,白定法的报道少这些方法虽然省去了除蛋白的并按下列办法加液(毫升),,操作步骤但有的须作血清空白对照管血清加人物测定管标准管空白管用量仍1,;较大(毫升)操作亦不够简便有的待测血清,。用血量虽然少了但需时较长为了适应工作肌醛标准应用液的需要,经过实践探索,我改进了Ra砰b
2、o氏0.olNHCI.33,2,应用苦味酸试剂法山将血清用量减少为0毫升一般免作,,、空白对照管简化了操作程序使其成为简易,即刻以72型分室温放置20分钟光光度,,微量测定法应用甚为方便亦可适应于生化,1计比色记录光密度(波长510毫微米厘米光,。自动分析仪测定现介绍如下,。:径比色杯用空白管调零点)按下式计算测定管光密度xZ一0.4(蛋白质影响因数)=血清材料与方法标淮管光密度一、试剂肌醉毫克形2.碳酸盐缓冲液0.IM(pH10.6)·····················…….5碳酸钠10克碳酸氢钠··················……
3、.9克0燕溜水·········……加至1,。0毫升..2,氢氧化钠溶液04M3.1.5饱和苦味酸溶液(约克形)光密度八”ónō声乃n4.应用缓冲液:取0.IM碳酸盐缓冲液.。3,015050毫升加4M氢氧化钠溶液毫升5.应用苦味酸试剂:取应用缓冲液250nUnùn卜,o,加,毫升饱和苦味酸溶液250毫升装人棕色:2,。瓶内室温保存.:6肌醉标准贮存液(l毫升今1毫克).。INH,用OCI配制贮于冰箱内1015207.肌醉标准应用液(肌配(毫克%)2毫克%:)取肌醉,,标准贮存液2毫升放人100毫升容量瓶内附图肌醉呈色的线性(751分光光度计比
4、色)、三重复试验.结果与讨论11,,份混合血清连续测定15次结果一、:作了肌醉浓度0.5~为.46、1.56、1.40、1.44、1.56、1.48、肌醉呈色的线性1..、.、.、.、.、.、.、200,1111111毫克%的范围(相当于血清含量)结果50604850624650.、..。,,11,1,见附图可见在此浓度范围内线性关系良7056毫克形平均值52毫克形标。..。,CV)5好准差008误差系数(26%.。、回:8,21,二收试验作了例回收试验加人标本放置观察份混合血清贮于..,,,1,4℃冰箱17量为05~40毫克%结果见表回收率内
5、每天取出测定次连续测定..。.、.、.、.、.、,,为963~1029形符合一般要求天结果为443406432460391.、..表1血清肌醉为2.05毫克万的回收率427422毫克%,平均值426毫克形,..。,加人量}回收量(毫克%)}回收率标准差023CV54%、(毫克%)理论实际(%)四本法与除蛋白法(改良Tasusky法户〕}}….,,2,对照30例结果本法平均值为90毫克%标堆误0.68毫克%;除蛋白法平均值为2.94月..八曰,Unl往压八曰一了nU01103.。-nI0,t毫克%标谁误06毫克%两法测验无显103.0..。t,r
6、著差异(=0885P>03)相关系数()为é马q9ó皿`八éóU八川八曰éǎ日ùa1Ll曰八0CUCH八行0nJ门n0勺O.0.……...。,P,卫工J.L0995<001高度相关………五、不同温度对不同样品显色的影响及显:。色后色度稳定性观察实验方法及结果见表2表2温度对不同样品显色的影响及色度稳定性样品种类及显色温度光密度室温不同放置时间后光密度不同放置时间后光密度/光密度产10,,,,,10,,,,,(时间20)20406080204060802毫克%肌醉液:0.0950。1000.0980.0980.1010.1001.051.031.
7、031.06...........C)室温(25C)010501030102010201030102098097097098。...。..。..(3.1020114015I水浴(37C)0085009801190127120134140血清:0.1300.1350.1420.1500.1580.166l。041.09l。15l。22.。.....。.。25oC)室温(C)005700580059006400670070102l04112l18。。...。。。..(.06200670水浴(37C)0060006200670068097l00108
8、108:血清无蛋白滤液(.室温(25C)6水浴(37C)由表2可,。见不同温度对肌醉标准液和血分必要,。清无蛋白滤液显色有一定影响但不很显著、六观察在
