苹果树腐烂病致病菌和拮抗菌的筛选.ppt

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1、关于苹果树腐烂菌的研究报告人：王娟娟实验展望及目的实验材料及仪器实验方法及步骤实验预期结果2苹果树腐烂病(appletreevalsacanker)是我国各苹果产区普遍发生且为害严重的病害，由多种Cytosporaspp．引起。但由于我国病原菌的种类及其致病性分化情况至今尚不清楚，严重影响了人们对病害发生和流行规律的认识，制约了对病害预测、预报和寄主抗病性的研究，致使病害防治缺乏相应对策。因此，本文选用在PDA上培养性状差异明显的若干株腐烂病菌分离株为对象，对其生物学特性与致病性的关系进行了研究。实验目的3实验材料及仪器PDA培养基LB培养基牛肉膏蛋白胨培养基腐烂的苹果枝

2、健康的苹果枝摇床4致病菌的筛选1l病原菌的鉴定2分离菌的回接及致病性测定教学过程致病菌的再分离拮抗菌的筛选5致病菌的筛选灭菌培养皿，置于湿纱布上，用无菌操作法向培养皿中加入25％乳酸1~2滴，然后将冷却至50℃左右的PDA培养基倒入培养皿中，每皿倒10~15ml，轻轻摇动成为平面。取采集到的苹果腐烂病病组织，选择典型单个病斑，用剪刀从病斑边缘(病健交界处)剪取小块病组织数块，放入70％酒精浸3s，移入O．1％升汞液中进行表面消毒，放入灭菌水中漂洗5次，除去残留的消毒剂。将病组织移至PDA平板培养基上，每皿4块。重复多次，筛出纯菌。6病原菌的鉴定将获得致病菌纯培养物分别移植

3、在PDA、苹果树枝条汁培养基，28℃恒温培养。每隔3d观察一次菌落培养性状，色泽．测定菌落生长速度，并在低倍显微镜观察真菌菌丝，进行初步判定。7致病菌的再分离采用常规组织分离法从接种发病枝条分离致病菌，在PDA培养基平板上获得纯培养，并与原接种致病菌进行比较．8分离菌的回接及致病性测定ThemeGalleryisaDesignDigitalContent&ContentsmalldevelopedbyGuildDesignInc.第一步，选取技条：分别取苹果无病2a生枝条．截成20Ca长的小段，每个菌种用30段．第二步，消毒：将切成的小段用7505酒精表面消毒，再用无菌水

4、冲洗．第三步，接种：先用烙铁把切成的小段烫伤，再向苹果枝条小段皮内接入适量的分离纯化苗丝．第四步，保湿：把接种的枝条小段与对照一同放入保湿缸内，置于25℃恒温箱内培养第五步，观察记录：每天观察同时记载发病情况。以烫伤不接菌的枝条小段为对照．统计发病率。9拮抗菌的筛选从土壤中富集细菌，然后在肉膏蛋白胨培养基上培养，根据其形态、菌落初步筛出不同的菌，进一步进行分离纯化。把土壤中筛出的菌和致病菌共同培养，观察数天，看是否出现抑菌圈，以及抑菌圈的大小。重复该步骤。10实验预期结果回接及致病性的预测：用分离的致病菌接种苹果的两年生枝段，均能发病，表现与田间相同的症状。致病菌在接种几

5、天后开始显症，此后病斑向四周扩展，病部开始有黑色小点出现，对照均未感病。拮抗菌的筛选的预测：会出现大小不同的抑菌圈11感谢您的关注！