ALT活性的测定.ppt

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1、实验项目ALT活性的测定(URIT-800半自动生化分析仪)一、临床意义【参考值】:0~40U/LALT是丙氨酸氨基转移酶,也叫谷丙转氨酶的缩写符号。正常情况下,该酶主要存在于肝细胞内,只要极少量被释放入血浆中。当组织发生病变时,细胞内ALT被大量释放入血,引起ALT活性增高。是诊断肝功能的主要指标之一。5、血清谷丙转氨酶活性测定是目前临床上诊断肝脏疾病的一种重要方法,但不具有特异性。ALT升高常见于:1.急性肝炎和中毒肝细胞坏死时显著增高。2.慢性肝炎、肝硬化及心肌梗死时中度增高。3.阻塞性黄疸和胆道炎症时轻度增高。外科手术,早期妊娠时也有升高。4.生理性的

2、升高如:过度劳累,剧烈运动、睡眠不好油炸食品等。二、实验目的1.掌握测定ALT活性的原理、方法和临床意义。2.掌握URIT-800半自动生化分析仪的使用。三、实验原理1.L-丙氨酸+a-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸2.丙酮酸+NADH+H+LDHL-乳酸+NAD+3.NADH的氧化速率与血清中ALT的活性成正比,通过测定340nm处NADH的下降速率,即可计算出ALT的活性(单位:U/L)。四、实验器材与试剂(1)试管1支(2)水浴箱1台(3)试管架1个(4)洗耳球1个(5)微量移液器1支(6)刻度吸量管(5ml)1支(7)半自动生化分析仪1台实验器材(1

3、)血清(2)试剂实验试剂五、实验内容和操作过程1、加样:取1支干净试管,加1mL试剂,10mL血清,混合均匀。2、测定:在URIT-800半自动生化分析仪上(波长340nm)测定血清ALT的活性。3、记录注意:加样后应迅速测定结果!六、结果及分析经过检测得到的血清ALT活性为多少,是否在正常范围内(参考浓度为0~40U/L),若在为什么,若不在为什么。1、记录结果(单位:U/L)。2、结果分析【思考题】血清ALT活性测定的临床意义有哪些?

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