HSP9O基因论文:基因 基因克隆 mRNA表达 实时荧光定量PCR 近江牡蛎

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1、HSP9O基因论文:近江牡蛎HSP90基因及其对理化胁迫和病原菌感染的反应【中文摘要】热休克蛋90(HSP90)是热休克蛋白90家族中的主要成员之一,是重要的抗逆分子,有稳定蛋白质结构,保护细胞修复损伤的作用。研究表明海洋双壳贝类HSP90基因可被多种外界胁迫因素诱导调节,可能在生物体抗病抗逆的生理过程中发挥重要作用。近江牡蛎(Crassostreahongkongensis)作为我国南方沿海常见养殖贝类,养殖过程中,受环境胁迫死亡时常发生。因此,探讨HSP90分子在近江牡蛎抗病抗逆中的反应,以期为进一步阐明HSP90基因在此过程中的作用机制提供基础资料。本研究采用简并引物PC

2、R、RACE和锚定PCR法,克隆了近江牡蛎HSP90的cDNA和基因序列,包括5’端调控区序列,在此基础上,建立实时荧光定量RT-PCR方法,研究了在热休克、孔雀石绿胁迫以及弧菌感染情况下,近江牡蛎HSP90基因的表达变化规律。主要结果如下:近江牡蛎HSP90cDNA全长2425bp(已提交GenBank,登陆号:HQ450642),包括一个76bp的5’非编码区序列,198bp的3’非编码区序列,具有典型的poly(A)尾及其上游12bp处的真核细胞加尾信号(AATAAA),开放阅读框(ORF)序列长度为2...【英文摘要】Variousstressesfacedbytheo

3、rganismsduringtheirlifespancausedirectdamagetovitalproteinsleadingtotheimpairmentofcellularprocesses.Damagetocellsasaresultofstresscaninvolveoneofthetwoopposingresponses:apoptosis,aformofcelldeaththatremovesdamagedcellstopreventinflammationorstressresponsethatpreventsdamageandfacilitatesreco

4、verytomaintaincellsurvival.Heatshockprotein90(HSP90)isahighlyconservedmolecularchaperonethatplayskeyroleinthefoldin...【关键词】HSP9O基因基因克隆mRNA表达实时荧光定量PCR近江牡蛎【英文关键词】HSP90genegenecloningmRNAexpressionreal-timefluorescencequantitativeRT-PCRCrassostreahongkongensis【索购全文】联系Q1:138113721Q2:139938848【目录

5、】近江牡蛎HSP90基因及其对理化胁迫和病原菌感染的反应中文摘要4-6Abstract6-7第一章文献综述10-241.热休克蛋白概述10-181.1前言101.2热休克蛋白家族分类10-111.3HSP90简介11-182.贝类HSP90研究进展18-193.基因表达常规分析方法19-224.研究目的及意义22-24第二章近江牡蛎HSP90基因克隆24-501材料24-251.1实验材料241.2实验主要试剂24-251.3实验主要仪器252实验方法25-402.1实验动物取样及保存252.2试验用品的预处理252.3总RNA的提取25-262.4RNA的质量分析262.5近

6、江牡蛎第一链cDNA的合成262.6近江牡蛎HSP90cDNA全长序列的克隆26-362.7近江牡蛎HSP90cDNA全长序列的获得362.8近江牡蛎HSP90基因序列克隆36-403结果40-483.1近江牡蛎RNA40-413.2近江牡蛎HSP90基因序列克隆41-463.3近江牡蛎HSP90同源性分析46-473.4HSP90系统发育树构建473.5HSP90基因5’端调控区序列47-484讨论48-50第三章近江牡蛎HSP90基因对理化胁迫的反应50-64第一节非应激条件下近江牡蛎HSP90基因在不同组织器官的表达50-551.1材料和方法50-521.2结果52-54

7、1.3讨论54-55第二节热休克处理后近江牡蛎HSP90基因的表达55-602.1材料和方法55-562.2结果56-592.3讨论59-60第三节近江牡蛎HSP90基因对孔雀石绿胁迫的反应60-643.1材料和方法60-613.2结果61-623.3讨论62-64第四章近江牡蛎HSP90基因对于溶藻弧菌感染的反应64-681材料和方法64-652结果65-663讨论66-68主要结论68-69参考文献69-79常用英文缩略词说明79-80研究生期间论文发表情况80-81致谢81

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