沙门氏菌的生物学特性及鉴定要点.ppt

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1、沙门氏菌的生物学特性及鉴定要点1.形态与染色：革兰氏阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛。2.培养特性：在麦康凯平板上35℃培养18~24小时，形成无色、透明的菌落。SS平板上显无色、透明菌落，但大部分菌落中央显黑色（产H2S）沙门氏菌分为6个亚属，2200多个血清变型。D群中的伤寒沙门氏菌是临床上最为重要的沙门氏菌。3.生化反应：氧化酶（-）,发酵葡萄糖,乳糖（-）,TSI或KIA为K/A，有动力，赖氨酸脱羧酶（+），硝酸盐还原试验（+），大多菌主H2S（+）。KIA：斜面（K），底层（A），H2S"（

2、+）或（-）"MIU：动力（+），吲哚（-），脲酶（-）4.鉴别要点：4.1本菌属特点：选择SS平板上无色透明、半透明或中心黑色的菌落，TSI为K/A，H2S（+）或（-），动力（+），氧化酶（-），脲酶（-）符合上述特性者，可通过血清凝集试验做出诊断。4.2与志贺菌属的鉴别：少数伤寒沙门氏菌在TSI或KIA上H2S（-），动力不明显，易于志贺氏菌相混淆，可用血清凝集试验相鉴别。5.操作步骤5.1观察菌落特征，挑取可疑菌落做KIA，MIU或TSI初筛。5.2血清学鉴定5.3从SS平板上挑取纯菌落，传

3、统生化反应进行菌落坚定。5.4初步鉴定KIA斜面、底层、产气、H2SMIU动力、吲哚、脲酶诊断血清凝集甲型副伤寒KA+-/++--AFO多价+A+乙型副伤寒KA++++--AFO多价+B+丙型副伤寒KA++++--AFO多价+C+Vi+伤寒沙门氏菌KA-+/-+--AFO多价+D+Vi+其它沙门氏菌KA+++--AFO多价+肠炎+6.血清凝集步骤6.1筛选：取营养琼脂斜面（或KIA斜面）培养物与AFO多价抗血清作玻片凝试验，若呈明显凝集，提示被检菌可能属于AFO6个0群范围内，再按0抗原血清凝集定群

4、。若与多价0抗血清不凝集，有如下3种可能：（1），含有Vi抗原（2），AFO群之外的沙门氏菌（3），沙门氏菌以外的细菌，按下述方法进一步检验。将营养琼脂斜面培养物用1ml无菌生理盐水或蒸馏水洗下，制成浓厚菌液，再合成2份，1份不经处理，为洗菌液，另一份放100℃水浴中30分钟，为加热菌液。取活菌与Vi抗血清，取加热菌与Vi抗血清，AFO多价抗血清分别进行玻片凝集试验。根据结果作如下分析：（1）活菌与Vi抗血清凝集，加热菌与Vi抗菌，按下述定群用O7和O9抗血清定群；（2）活菌与Vi抗血清不凝集，

5、可能属于AFO群意外的沙门氏菌或其他菌属细菌，应进行全面生化试验定属，若符合沙门氏菌属细菌特征，宜送专门机构鉴定；（3）加热菌也与Vi抗血清凝集，而与AFO多价O抗血清不凝集者，可报告为阴性。6.2定群取O2（A群），O4（B群），O7（C1群），O8（C2群），O9（D群），O3.10（E群），O11（F群）分别进行玻片凝集试验。若与其中1种因子血清凝集，可报告为阳性。6.3血清型分析：菌群确定后先分析第1相鞭毛抗原，再分析第2相鞭毛抗原。A：第1相鞭毛抗原分析：根据菌群分析结果，分别选用第1相

6、鞭毛因子血清进行玻片凝集试验。B：第2相鞭毛抗原分析：改用抗血清，通常是复合因子（1，2，3，5，e，n，x，i，w）血清。C：单相菌，若第1相已确定，可结合菌群分析及生化反应结果判定血清型Thankyou!