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1、医学新知杂志2003年第13卷第4期·201·＊白消安诱导小鼠无精子症模型张茨王玲珑金化民宋超武汉大学人民医院泌尿外科武汉430060【摘要】目的采用白消安诱导建立小鼠无精子症模型。方法采用腹腔内单次注射白消安(40mg/kg),对白消安的毒性、模型的形态学变化,小鼠的生育能力以及免疫功能进行了观察。结果白消安单次注射可造成半数的小鼠死亡,用药后4周,睾丸曲细精管呈唯支持细胞样表现,3个月有20%的曲细精管恢复生精,存活小鼠中半数小鼠的生育力正常,模型小鼠的免疫学功能正常。结论该小鼠无精症模型用作生精干细胞移植的受体模型是
2、可行的。关键词小鼠;无精症;模型InductionofAzoospermiaModelinMicebyBusulfanZhangCi,WangLinglong,JinHuamin,etalDepartmentofUrology,RenminHospitalofWuhanUniversity430060【Abstract】ObjectivesUsingBusulfantoestablishamodelofazoospermiainmice.MethodsBusulfan(40mg/kg)wasinjectedintraper
3、itoneally.Themortalityandtoxicityofthedrug,themorphologicalchangesoftestis,fertilityandim-munefunctionfollowingbusulfantreatmentwerestudied.ResultsThedosageresultedinoverhalfdeathinthemice,thetestesofsurvivedmiceshowedonly-sertolicellsseminiferoustubulesafter4week
4、swithnormalimmunefunction,halfofthesurvivedmicehadnormalfertilityand20%seminiferoustubulesrecoveredspermatogenesisin3months.ConclusionsThemodelcanbeusedasrecipientingermcelltransplant.KeywordsMouse;Azoospermia;Model原发性无精子症往往存在精原细胞的缺失或成末,切取8只小鼠的单侧睾丸,用10%的中性福尔马熟障碍,生
5、精干细胞移植技术为治疗这类疾病提供林液固定,HE染色后,观察睾丸的生精上皮结构变[1]了一种有效治疗手段。为此,需要建立一种无精化,了解模型的构建情况。于注药后3个月,切取对子症的动物模型进行同种生精干细胞移植的研究。侧睾丸制备病理切片观察生精功能恢复情况。我们采用白消安(Busulfan)腹腔注射法成功诱导小1.4生育实验在白消安注射后3个月,取8只鼠无精子症模型,并观察其形态学变化和生精功能模型小鼠分别与正常有生育力雌鼠同笼2周,观察的恢复情况。受孕及产仔情况。1材料与方法1.5单向混合淋巴细胞培养取2只注射后4周1.
6、1实验动物及模型建立雄性4～6周龄昆明模型小鼠脾细胞与丝裂霉素C灭活的BABL/c小鼠白(KM)小鼠40只(购自华中科技大学同济医学院脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养,以转化淋巴细实验动物中心),平均体重28.6g。将白消安(Sigma胞百分率大于10%作为阳性指标。了解模型小鼠产品)配制成2%DMSO水溶液,于37℃水浴中保持免疫功能状况。[2]恒温防止DMSO凝固。每只小鼠按40mg/kg行2结果腹腔内单次注射,在室温20℃左右的环境中常规饲2.1死亡情况及毒性反应于用药后2周实验小料喂养4周后检测模型完成情况。鼠开始出
7、现死亡,到用药后3周,小鼠相继死亡221.2小鼠存活情况及药物毒性观察由于白消安只(55%),主要发生在体重偏低的小鼠。此后存活对骨髓造血功能可产生抑制作用,在实验期间应持的小鼠不再死亡。观察濒临死亡小鼠的耳廓及尾部续观察小鼠的存活情况。于小鼠处死前,应用心脏色泽较存活小鼠和正常小鼠明显苍白,呈贫血貌,体[3]穿刺采血法抽血,用于作血液分析和血象检查。重明显较正常小鼠轻(平均减少5～6g)。血液颜色1.3光镜形态学观察注射白消安后的第4周呈淡红,血液分析及血象显示红细胞系和粒细胞系的生成明显受到抑制,部分小鼠血象中以早幼粒
8、细湖北省教育厅资助项目,编号:2000B03008胞为主,但淋巴细胞比例及形态均正常。由于未进张茨,男,博士,副主任医师;武汉,武汉大学人民医院泌尿外行骨髓移植,死亡发生率明显较国外文献报道高。科(430060)存活的18只小鼠在注射后4周,血象检查已趋正常。·202·医学新知杂志2003年第13卷第4
