BL21 Gold pLysS(DE3)化学感受态使用说明.pdf

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1、BL21GoldpLysS(DE3)化学感受态BL21GoldpLysS(DE3)ChemicallyCompetentCell编号名称规格单位北京华越洋WG3699sBL21GoldpLysS(DE3)10×100ul包北京华越洋WG3699BL21GoldpLysS(DE3)20×100ul包BL21GoldpLysS(DE3)化学感受态细胞基本信息：BL21GoldpLysS(DE3)基因型:arE.coliBF-dcm+HteompThsdS(rB-mB-)galλ(DE3)[pLysSCamr]endATe

2、tBL21GoldpLysS(DE3)菌株介绍：BL21andBL21-Gold-derivedcompetentcellsaredesignedforhigh-levelproteinexpressionusingT7RNApolymerase-basedexpressionsystems.‡‡TheBL21(DE3)pLysSandBL21-Gold(DE3)pLysScompetentcellsprovidetightercontrolforexpressionoftoxicproteins.Whenusedw

3、iththeCE6bacteriophage,theBL21andBL21-Goldcellsprovidethetightestcontrolofproteinexpression,importantforextremelytoxicproteins.Inaddition,theBL21andBL21-Goldcellscanbeusedfornon-T7RNApolymeraseproteinexpressionsystems.AllBL21strainsaredeficientintheOmpTandLonpr

4、oteases,whichmayinterferewithisolationofintactrecombinantproteins.UsetheBL21ortheBL21-GoldcompetentcellsanditsderivativeswithT7promoter-drivenvectors,suchastheAffinity®pCALvectorsandpETvectors.BL21GoldpLysS(DE3)使用说明:1.本产品采用干冰运输，收到后请直接冻存于-80℃冰箱。2.取冻存于-80℃的100μl感

5、受态细胞于冰上融化；3.加入1μl纯质粒，轻轻吹打混匀，冰浴30min；4.将菌液放入42℃水浴中热激45sec，立即放入冰浴中2min；5.加入900μlSOC/LB培养基，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育；6.将菌液5000rpm×5min离心，弃尽上清；7.取100μl新鲜LB培养基将菌体打散，均匀涂布于对应抗性平板表面；8.平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕，再倒置37℃培养过夜。BL21GoldpLysS(DE3)注意事项:1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2.本产

6、品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。3.混入质粒或连接产物时应轻柔操作，感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。4.涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。5.新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。6.涂

7、布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。