小麦α-淀粉酶活性测定方法比较.pdf

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1、陕西农业科学小麦Q一淀粉酶活性测定方法比较岳海凤。郜庆炉。薛香。(1．河南农业大学，河南郑州450002；2．河南科技学院，河南新乡453003)提要：采用凝胶扩散法、3，5-二硝基水杨酸比色法和降落值法分别测定小麦旷淀粉酶活性，对测定结果进行了比较分析，结果表明：虽然3种方法都可以测定淀粉酶活性，但是凝胶扩散法与3，5-二硝基水杨酸比色法的结果存在显著的曲线相关．直线性相关不显著，3，5-二硝基水杨酸比色法与降落值法的结果呈极显著负线性相关。通过比较研究，认为降落值法是测定大量样品淀粉酶活性的最佳方法。关键词：小麦；淀粉酶活性；

2、测定方法；比较a一淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理个样品重复3次，a一淀粉酶活性的计算公式为：a一指标，a一淀粉酶活性低的品种抗穗发芽，反之则易淀粉酶活性(mg／g·min)一穗发芽[I]。目前，关于a一淀粉酶活性的测定方法浓度(mg／m1)×体积(mI)×稀释倍数样品鲜重(g)×时间(min)很多种，活力单位的定义也各不相同，国内外测定(3)降落值法：采用瑞典FallingNumber公a一淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3，5一司生产的降落数值测定仪(FN一1600型)对后熟面二水杨酸比色法和降落值法。这3种方法所粉测

3、定，每个样品测定2次，取平均值作为各样品用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉，获得的实测数据，单位S。的a一淀粉酶活性应该分别是延迟(内源)a-淀粉酶、萌动种子a一淀粉酶和后熟面粉的a一淀粉酶活2结果与分析性，虽然都可以表示a一淀粉酶，但彼此是否存在2．13种测定方法结果的相关性分析相关性未见报道，笔者对这3种方法进行比较研表13种测定结果的相关系数究，以探讨这些测定方法之间的相关性，为小麦品质育种提供参考。降落值DNS测定方法——直线相关曲线相关直线相关曲线相关1材料和方法1．1材料在F代中随机选取的16个杂交组合作为试注：*

4、为5％显著水平，**为1显著水平。从表1可以看出3，5---"硝基水杨酸比色法验材料。(DNS)与降落值的结果具有显著的直线性相关，1．2方法说明降落值的高低能间接地反映萌动种子中n一i．2．1测定a一淀粉酶活性的方法采用三种方淀粉酶活性的大小，这与前人研究的a一淀粉酶活法对a一淀粉酶进行了测定。性与降落值呈极显著负相关[6,73的研究结果一(I)凝胶扩散法：按照卫秀英等Ⅲ改良过的方致，而凝胶扩散法与降落值法、凝胶扩散法与3，法对花后30d种子测定a一淀粉酶，每个样品重复5一二硝基水杨酸比色法的测定结果均未达到显著3次，a一淀粉酶

5、活性的计算公式为：的直线性相关，而存在显著的曲线相关，说明测定a一淀粉酶活性(“／g)一的延迟(内源)a一淀粉酶与萌动种子a一淀粉酶、延鎏廑昼!签!：堡星样品鲜重(g)迟(内源)a～淀粉酶与后熟面粉的a一淀粉酶活性仅(2)3，5一二水杨酸比色法(DNs)：按照李合在一定范围内具有直线相关。生3的方法对萌动种子进行a一淀粉酶的测定，每2．23种测定方法的比较收稿日期：2008—07—07项目来源：河南省自然科学基金项目(0424060016)和河南省高校创新人才培养T程(豫教高[20051126号)。作者简介：岳海凤(1982一)，

6、女。河南濮阳人，在读硕士生l研究方向：作物遗传育种。通讯作者：薛香(1963一)，女，副教授；主要从事遗传育种教学工作。岳海风等：小麦淀粉酶活性测定方法比较表23种测定方法的比较DNS法是目前农业科研中应用最为普遍的测量扩散圈直径的大小，再经换算计算出来，可能一种方法，从表2可以看出，DNS法适宜于精确存在某些误差，所以，该方法灵敏度与准确度较测量小样品a一淀粉酶活性大小，但是不便分析大低，对于精确测量a一淀粉酶活性大小是不合适量样品，降落值法是测定大量样品n一淀粉酶活性的，只能作为鉴定小麦穗发芽的参考，而不能作为的最佳方法。测定

7、a一淀粉酶活性大小的标准方法。DNS法与降落值法呈极显著直线负相关，说明降落值的高3小结与讨论低能间接的反映萌动种子中a～淀粉酶活性的大3，5二硝基水杨酸比色法(DNS法)可直接小，这与前人研究的a一淀粉酶活性与降落值呈极测定萌动种子a一淀粉酶活性的大小，它的操作过显著负相关的研究结果一致。在鉴定小麦穗发芽程要求比较严格，需要保证准确的反应时间和温抗性时，可通过测定小麦降落值来预测a一淀粉酶度，测定结果才可靠，适宜于精确测定少量样品中活性，使之更快而准确地反映出小麦抗穗发芽能a一淀粉酶的活性。试验表明：DNS法与凝胶扩散力。通过分

8、析比较研究，认为降落值法是测定大法测定的a一淀粉酶活性的结果具有曲线相关性，量样品a一淀粉酶活性的最佳方法。而直线相关不显著，说明延迟(内源)a一淀粉酶活参考文献性的高低并不与萌动种子a一淀粉酶的高低一致，仅在一定范围内存在直线相关。在凝胶扩散法测