PH0519 0.4%台盼蓝染色液操作手册.pdf

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1、PH0519

2、0.4%台盼蓝染色液（TypanBlueStainingSolution）CatalogNo：PH0519Size：50mL

3、100mLStoreat4℃简介台盼蓝（TrypanBlue)或称台盼兰、锥虫蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不会被染成蓝色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。台盼蓝可被巨噬细

4、胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需3-5分钟，操作简单。保存4℃保存,一年有效使用参考1.收集细胞：用胰酶和/或EDTA消化贴壁细胞，悬浮细胞可直接收集。收集的细胞时用1000-2000rpm离心1分钟，弃上清，制备单细胞悬液，并做适当稀释。2.台盼蓝染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1比例混匀（终浓度0.04%），染色3分钟(染色3分钟时间已经足够，但染色时

5、间可以更长一些，但不宜超过10分钟)。3.细胞计数：吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大，无光泽；活细胞不着色并保持正常形态，有光泽。通常要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞。细胞存活率（%）=活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%注意事项1.染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏低；2.有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。