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时间:2020-03-20
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1、基本性质中英文名称:台盼蓝(TrypanBlue)或称台盼兰、锥虫蓝 分子式:C34H24N6O14S4Na4 分子量:960.82 可溶于水(10mg/ml) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。机理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、
2、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。 台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。步骤 步骤:(来自supergama) 1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品);T$d&!h%l,E)Z)A-W 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。 3、染色:细胞悬液
3、与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%) 4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。1e7e*I*S)^%X8U$K-_ 5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。6、统计细胞活力:活细胞率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%其他 保存条件 室温保存 说明 有潜在致癌危险 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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