【生物工程专业】【毕业设计+文献综述+开题报告】不同来源SOD性质比较

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1、（20届）毕业论文不同来源SOD性质比较III摘要：超氧化物岐化酶(Superoxidedismutase，简称SOD)作为生物体内重要的自由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离子，在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。本实验主要从大肠杆菌中分离纯化其发酵产生的SOD，同时采用两次丙酮沉淀法和热处理工艺提纯猪血SOD，并通过邻苯三酚法测定其活性，最后用考马斯亮蓝法测其蛋白浓度，得到比活为8154U/mg的SOD蛋白。二者在耐热性、热稳定性等方面有不同的性质。关键词：超氧化物歧化酶；邻苯三酚法；分离纯化III不同来源SOD性质的比较Abstract:Superoxidedismutase(S

2、OD)actsasafreeradicalscavengerinalivingorganism.Itcanremoveextrasuperoxideanioninhumanbody,sothatplaysanimportantroleindefendingoxidativedamage.InthisstudywepurifiedtherecombinantSODexpressedinE.coil.Atzhesametime,acetoneprecipitationandheattreatmentprocessareusedtopurificationSOD.Thespecificactiv

3、ityofthefinalproductwas8154U/mg,whichwasdeterminedbyactivitytestandproteinconcentrationmeasurement.ThestabilityexperimentshowedthatthepurifiedSODproteinhadrelativehighthermostabilityandsoon.Keywords:Superoxidedismutase；pyrogallicacid；purificationIII目录中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

4、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．（Ⅰ）英文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．（Ⅱ）1引言11.1超氧化物歧化酶的概况11.2超氧化物歧化酶的分类及其分布11.3SOD的作用机理21.4SOD产品研究现状和应用前景21.5SOD分离提纯的几种主要方法31.6本实验所采用的SOD提纯方法概述32.1材料与试剂42.1.1材料42.1.2试剂42.2实验仪器42.3实验方法42.3.1微生物细胞中提取SOD42.3.1粗酶液的制备42.3.1.2粗酶液的热变性处

5、理52.3.1.3PEG-20000浓缩SOD52.3.1.4SepHadexG-100分子筛纯化SOD52.3.1.5SOD活性的测定72.3.1.6SOD酶液浓度的测定82.3.1.7聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE）82.3.1.8微生物SOD分离纯化的工艺流程图102.3.1.9SOD最适温度和热稳定性实验102.3.2猪血中提取SOD122.3.2.1分离红血球:122.3.2.2洗涤红血球122.3.2.3溶解破碎血细胞122.3.2.4萃取122.3.2.5第一次丙酮沉淀122.3.2.6热处理122.3.2.7二次丙酮沉淀132.3.2.8猪血SOD分离纯化的工艺流程图13

6、2.3.2.9猪血中SOD活性的测定142.3.2.10猪血中SOD酶液浓度的测定142.3.2.11猪血中SOD热稳定性实验142.3.2.12pH值对酶活性的影响实验143.1基因工程菌SOD的各种性质153.1.1PEG-20000浓缩SOD153.1.2SepHadexG-100分子筛纯化SOD153.1.3考马斯亮蓝法测定SOD酶液蛋白浓度结果153.1.4聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结果163.1.5基因工程菌SOD热稳定性试验173.1.6pH值对酶活性的影响试验183.2猪血中SOD的各种性质183.2.1样品蛋白质含量测定结果183.2.2猪血SOD热稳定性试验

7、193.2.3pH值对酶活性的影响试验193.3基因工程菌SOD及猪血SOD性质比较203.3.1在酶活方面用邻苯三酚法测定留样的酶活203.3.2在最适温度方面203.3.3在热稳定性方面213.3.4在最适pH方面21致谢24参考文献251引言1.1超氧化物歧化酶的概况氧的某些代谢产物及其衍生的含氧物质都是直接或间接由氧转化而成的[1]。由于它们都含有氧，而且具有较活泼的化学反应特性，遂统称为活性氧（Activeox