RNA电泳操作步骤

RNA电泳操作步骤

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时间:2019-10-25

RNA电泳操作步骤_第1页
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1、RNA电泳试剂:琼脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。步骤一5xMOPS-EDTABuffer的配制(0.1MMOPSpH7;5mMEDTA;10mMNaAc)1.称量20.9g的MOPS,置于1L烧杯中。2.加700mLDEPC水溶解。3.用2NNaOH调节pH至7.04.在上述溶液中加入10mL的1M的NaAC5.溶液中加入10mL的0.5M的EDTApH=8.06.加DEPC水定容至1L7.用0.45um滤膜过滤后避光保存二RNA样品处理方法RNA样品Xu

2、L甲醛3.5uL甲酰胺4.0uL5xMOPS-EDTABuffer4uL6xLoadingBuffer3.0uLDEPC水Upto20uL混合均匀后,70°C加热5min,迅速冷却至室温。(PCR仪操作)三甲醛变性琼脂糖凝胶的制备加1g琼脂糖到31mLDEPC水中,另加10mL5xMOPS-EDTABuffer煮沸溶解。加入DEPC水定容至41mL。将溶液冷却至60°C左右,加入9mL37%甲醛,倒入胶槽中静置1小时。(胶中加入EB染料)四电泳混匀电泳槽中的1xMOPS-EDTABuffer电泳

3、液,加样,10v/cm条件下电泳约1小时。电泳期间每隔15min混匀电泳槽中的电泳液一次。

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