毕业论文《湖南省烟草马铃薯Y病毒株系的初步鉴定》

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1、湖南农业大学东方科技学院全日制普通本科生毕业论文湖南省烟草马铃薯Y病毒株系的初步鉴定CharaterizationofPotatoYvirusstrainsintobaccoofHunanprovince学生姓名：学号：年级专业及班级：动植物检疫(3)班指导老师及职称：教授湖南•长沙提交日期：2011年5月摘要1关键字11前言11.1烟草马铃薯Y病毒病的现状21.1.1烟草马铃薯Y病毒病的分布21」.2烟草马铃薯Y病毒病的危害21.2PVY株系的分化31.3PVY的检测方法42材料52」样品采集52.2主耍试

2、剂52.3主要仪器52.4引物设计63实验方法73」器皿的处理73.2总RNA的提取73.3RNA提取质量的检测83.4RT-PCR检测83.4.1cDNA的合成83.4.2PCR扩增83.5PCR产物的回收93.6感受态细胞的制备93.7冋收产物的克隆103.7.1U的片段与pGM-T载体连接103.7.2连接产物向大肠杆菌的转化103.8阳性克隆菌落的PCR鉴定103.9序夕U的测定114结果与分析114.1样品采集114.2RNA提取质量检测114.2.1琼脂糖凝胶电泳检测114.2.2RNA溶液吸光度

3、检测124.3RT-PCR检测124.4回收转化克隆144.5测序结果155结论与讨论15参考文献17致谢18湖南省烟草马铃薯¥病毒株系的初步鉴定学牛：胡婷丽指导老师：肖启明（湖南农业人学东方科技学院，长沙410128）摘要：马铃薯Y病毒(PVY)现广泛分布于我国各烟草区，已成为我国烟草上的主要病害Z-。近年来湖南省烟草马铃黑Y病毒病危害逐年加亜，严巫影响了我省烟草牛产。目前国际上普遍公认DeBokx等的株系划分方法，认为有3个株系：普通型(PVY。)、叶脉切因(PVY”)、点条斑型(PVYC)o木文建立了R

4、T・PCR法对湖南省烟草马铃蒋Y病毒进行株系鉴定，结果表明N株系为优势株系，并发现O株系和变异株系NTN株系侵染，有株系混合侵染情况。现需加强临控防治，避免NTN株系的扩散，降低PVY对湖南省烟草产业的威胁。关键字：马铃薯Y病毒株系；烟草；RT-PCR；CharaterizationofPotatoYvirusstrainsintobaccoofHunanprovinceStudent:HuTingliTutor:XiaoQiMing(CollegeofOrientedScienceandTechnology

5、,HunanAgriculturalUniversity,Changsha41012&China)Abstract：PotatoYvirus(PVY)iswidelydistributedineachChinesetobaccoareaasoneofthemaintobaccodiseases.Inrecentyears,theharmofHunantobaccoPVYdiseasehasaggravatedyearbyyear,seriouslyimpactedontheproductionandquali

6、tyoftobacco.Now,theinternationallyacceptedDeBokx，sdivisionmethodofPVYstrainsconsidersthatPVYstrainsaredividedordinarytype(PVY0),veinsnecrosistype(PVYN),scabstreaktype(PVYC).ThispaperhasestablishedtheRT-PCRmethodofhunanprovincetobaccoPVYtostrainidentificatio

7、nandtheresultsshowthatNstrainisanadvantagestrainandOstrainandNTNstrainarefound,andmixedinfectionsituationisfound.Weneedtostrengthenmonitoringcontrol,avoidthespreadofNTNstraininhunanprovince,reducethethreatoftobaccoindustry.Keywords:PVYstrain;tobacco;RT-PCR1

8、刖百1・1烟草马铃薯丫病毒病的现状1」」烟草马铃薯丫病毒病的分布烟草马铃薯Y病毒病乂称烟草脉坏死病、烟草脉带病、烟草黄斑坏死病等，□前已成为烟草上的主耍病害Z—o该病的病原物为马铃薯Y(potatovirusY,PVY)。该病毒于1931年在马铃薯种首次发现，从1953年起PVY在欧洲尤其在马铃薯种植区广泛流行，20世纪90年代初其在亚洲开始呈上升发展趋势。该病毒可侵染至少34属163种植物，以茄科