利用vigs防控烟草马铃薯y病毒的研究

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2、直：．：班．片．：＞．：扣苗：巧社－＂—＇二〇Ｗ．一五年六月一—，＇．‘一．：＇产’＇：分．巧从．九巧记，．門．，＇＇＇＇．一．＾‘：叫：－．－：：班朽；Ｖ：；與巧；巧苗读’－．．．心Ｖ川．真，巧Ｖ：＼＞＇Ｖ－？－？？＇＇■■．？？．．■？＇？＇．＇？＾，．’？Ｊ＊５．‘＇．．＇＇？？■‘．－＇？－－－＇－？／－．．，．＇？：Ｌｒ：．１—．１；：．，’＇’、■’．＇、？＇一；，：—．：纔議！；拭魏

3、攀攀雞議醒讓證數讚雜薛講鑛謂雜戀鑛雜＾；５窜．讓馨議纖議誦？議議讓雜Ｉ携麵＇．‘；巧：＇：巧在皆；片谋键寮谐姑鴻機ｒ：市辩中早掛＇巧转请古吉／满话热．搭考：护謂為换审？；厚韓譜分类号密级公开ＵＤＣ单仿代码１０５３７闹斋祭巫乂＃硕±学位论文利用ＶＩＧＳ防控烟草马铃蓄Ｙ病毒的研究ＴｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｆｏｒｒｅｖｅｎｔｉｎｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＹｉｎｐｇｐｔｏｂａｃｃｏｗｉｔｈＶＩＧＳ硏究生姓名魏润洁指导教师肖启明教授学科专业生

4、物安全与检疫硏究方向植物病理论文答辩日期．於答辩委员会主席＇秦片法论文评阅人詞巧．巧１予二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在巧导教师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外。尽我所知，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我巧工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签《Ｗ：乏时间：２。。多屯ｆｉ

5、＞Ｉ文年八３＇巧关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定目，Ｐ：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究化教育。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究化答名：时间：抓１它文年ｃ４月日指导教师竊时间＊ｏｆ：ｉＴ年月么＾／為１摘叟：

6、摘要马铃蓄Ｙ病毒（ｐｏｔａｔｏｖｉｍｓＹ，ＰＶＹ）是马铃著Ｙ病毒组的典型成员，主要依靠烟阿，由该病毒引起烟草病毒病、桃呀及人为机械性损伤在烟草上传播和扩散。多年来在我国烟草种植区多有发生，该病危害严重，、防治困难对我国烟草生产造成极大经济损失。随着ＲＮＡ沉默技术的发展，为马铃墓Ｙ病毒病在烟草上的防治提供全新的途径。＾本研究Ｗ马铃墓Ｙ病毒脉坏死株系（ＰＶＹ）为研究对象，设计带有酶切位点的特异＾＾ＰＣＲＰＶＹ－２ＰＶＹＣＰＨＣ－性引物，通过扩増的ＣＰ和ＨＣｐｒｏ个基因片段、。Ｗ的

7、ｐｒｏ基因为目的基因，烟草脆裂病毒（ＴＲＶ）改造载体ＰＴＶ０日为病毒载体，通过执ｊｆｌＨＩ／你ｎ巧个ＰＴＶ００－ＣＰ－－ｒｏ限制性内切酶构建、ＰＴＶＯＯＨＣｐ重组载体，使用电击法将重组载体转入农杆菌ＧＶ３１０１中。通过ＰＣＲ、酶切、测序等验证目的片段己转入农杆菌ＧＶ３１０１中，被试烟苗剪叶后使用农杆茜菌液喷施，通过剪叶后造成的伤口将重组表这载体导入烟草中，诱导烟草ＶＩＧＳ。通过人工接种ＰＶＹ病毒，调查被试烟草抗病性实验证明无论在实验条件下还是自然－条件下，都能有效的降解ＰＶＹＣＰ、ＨＣ

8、ｒｏ基因表达，从而表现出抗马铃馨Ｙ病毒ｐ。在自然条件下，设置８个处理６０Ｇ８０，、共７株烟草抗性试验表明导入ＣＰ基因的烟草对ＰＶＹ８３１ＨＣ－ＰＶＹ防治效果为．１％，导入ｐｒｏ基因的烟草对防治效果为８６．８３％，同时导入－７８ＣＰ和ＨＣｐｒｏ基因的烟草对ＰＶＹ防治效果为．３４％。关键词：ＶＩＧＳ；马铃墓Ｙ病毒；病毒诱导的基因沉默；烟草脆裂病毒：ＰＴＶ