CEA作业指导书作业指导书

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1、癌胚抗原检测作业指导书1•检验目的：CEA属癌胚胎性抗原，只在胚胎期产生，主要来源于胎儿的胃、肠道和血液。在正常成人的肠道、胰腺和肝组织中也有少量存在。出生后，CEA的形成被抑制，因此，在正常成人的血液中CEA很难测出。患有结肠腺癌的病人，CEA含量通常很高。而在20-50%的良性消化系统及肺部疾患屮，CEA含量通常不超过10ng/ml。吸烟者也常见CEA升高。CEA测定主要用于指导结肠癌治疗及随访。CEA测定不适用于普通人群的癌症筛查。因为CEA正常不能排除恶性疾病的存在。2•检验原理:采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。•第1步：30口1标本、生物素化抗CEA单克隆

2、抗体和钉（Ru）标记的抗CEA单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗CEA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。•第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和索间的反应结合到微粒上。•第3步：反应混和液吸到测量池屮，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。•检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。3.性能参数：3.1线性范围：线性检测结果见CEA方法学验证记录。3.2精密度:批内n=20,批间n=20o批内批间均值ng/mlSDng/

3、mlCV%均值ng/mlSDng/mlCV%0.62310.02173.485.1670.1673.233.3准确度：检测结果见临检中心/江苏省室间质评结果回报记录。3.4可报告范围:0.200—50000ng/ml,最大稀释倍数为50倍。3.5测量区间：血清/血浆：0.200—1000ng/mlo高于检测范围的标木可用通用稀释液稀释。。稀释后的标木CEA含量必须高于20ng/mE如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。3.6灵敏度:0.200ng/ml3.7特异性：无3.样本要求4・1血清：按标准常规方法采集。4.2血浆：肝素、EDTA-K3

4、.枸橡酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。4.3标本在2—8度可稳定2天，-20度可稳定6个月。只能冻融一次。4.4含沉淀的标木使用前需离心。4.5标本和质控品禁用叠氮钠防腐。5•试剂和设备：5.1设备：C0BAS6000组合模块E601（1）检查供水系统是否正常。（2）检查试剂盖是否松开。（3）接通仪器左侧上方电源按钮，仪器自检。（4）登录：输入用户名及密码，仪器初始化，进行自动维护，然后进入Standby状态。5.2试剂厂商：罗氏诊断产品公司5・3试剂及使用前准备（1）试剂成分：M：链霉亲和索包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5mlo粒子浓度0.72mg/ml,生物素结合能力：4

5、70ng生物素/mg粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗CEA单克隆抗体（灰盖），1瓶，8mlo浓度7.5mg/l,磷酸缓冲液0.lmol/1,pH6.0o含防腐剂。R2：Ru（bpy）32+标记的抗CEA单克隆抗体（黑盖），1瓶，8mlo浓度4.Omg/1,磷酸缓冲液0.lmol/1,pH6.5o含防腐剂。（2）试剂准备：检查各种试剂所需使用的试剂量(3)试剂贮藏要求：存放在2—8度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度12周；放在C0BAS6000上，8周；注意：仅供体外诊断使用；避免皮肤直接接触液体试剂；废弄物按生物危害垃圾处理。6.校准程序：6.1校准

6、品：罗氏COBAS6000原装校准品。要求在有效期内使用，过期的校准液应停止使用，保存于2・8°C可稳定到有效期。复溶：用复溶专用加样枪准确吸取lmL去离子水于瓶中，溶解静置1小时，混匀并用有盖小子弹头分装200HL/个，标明配制日期，校准品批号，配制人以及有效日期，于一20°C冻存备用。复溶后校准品成分的稳定性：2-8°C储存。稳定性：未打开，2-8°C有效期内均可打开后，2-8°C下：12周上机，20-25°C：只可使用一次(不可反复冻融)。6.2当下列任何一种情况出现时，请重新校准：⑴试剂批号改变⑵根据质控需要进行校准6.3校准步骤：6.3.1校准品的准备：从-20°C冰

7、箱中取出-•个分装的校准品，室温放置使其完全溶解，并颠倒混匀备用。6.3.2起始定标：进入Calibration,点击Status,选择该项目的定标方式(FULL),点击Save,按在Calibration画面下的Installation界面设置好的标准物放置位置装载好相应的定标液，再点Start按键，仪器开始定标；6.3.3重复定标：进入Calibration,点击Status,选择该项目的定标方式(FULL),点击Save,按在Calibration画面下的Installation界面设