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1、实验十广口瓶法测定植物的呼吸速率作者:來源:本站时间:2006-2-15呼吸辭是植物生命活动强弱的重要^标之f常用于植物生理研究及农业生产实践等方面口测呼吸速率的方法虽很多,但不外乎测定CO,的釋放量或Q的吸收量两类方法。本实验用广口瓶法测定植牧酌呼吸速率,并比较不同萌发拚段小麦种子及幼芽的呼吸速率。【原理】在密闭容器中加入一定星碱液(一般用Ba(OH)?)>并悬挂植物材料,则植物材料呼吸放岀的CO,可为容器中Ba(OH):吸收>然后用草酸滴定乘除的碱,从空白和样品二者消耗草酸濬液之差>可计算出呼吸释放的00:*n其反应如下:Ba(OH):+00:—BgI+H:OBa(OH):
2、(乘!]余)+HQQ.fBaCQZ+2H:0【仪谿与用具】广口刪I]呼吸装置1套;电子天平;酸式和磁滴定管各1支:旖定管架1套-【试剂】1/44mol/L草酸濬液:准确称取重结晶H;CA・2HQ2.8651g濬于蒸t詠中>定容至1000ml>每ml相当于lmgCO?o0.05mol/LSS化師諏:Ba(OH):8忽或Ba(OH)i・8H<315.78g濬于1000ml蒸t缽中.女晡浑浊,待濬液澄清后使用。酚敢扌旨示剂:称取lg酚敢濬于100ml95%乙醇中贮于滴瓶中口【方法】一、呼吸速率的测定人■弋乙口5」wvs.-vc.o-取500ml广口瓶1个'加一个三孔橡皮塞。一孔插入一
3、装有碱石灰的干燥管'使吸收空气中的CO,‘保证在测定呼吸时进入呼吸瓶的空气中无CO:;一孔播入温度计;另一孔直径约1cm,供滴定用。平时用1小橡皮整紧。在瓶下面装一小肉,以便悬挂用尼龙窗纱制作的小筐,供装植物材料用。2・空白滴定拔出滴定孔上的小橡皮塞,用碱滴定管向瓶内准确加入0.05moVLBa(OH)?®液20mb再把旖定孔塞紧。充分摇动广口瓶几min。待瓶内CO】全部被吸收后,拔出小橡鮭加入酚駄三滴,把酸滴定管插入孔中>用草酸进行空白滴定,至红色別刚消失为止'记下苴醸濬液用星(ml),即为空白滴定值。3•材料簡定值的测定倒出废液,先用自来水,再用新煮沸(为驰赶水中CO:)并
4、冷却的藝谙水洗i争广口瓶,重加20mlBa(OH)养容液于瓶内,取待测小麦种子1如粒「同时称出重星,装入小筐中,打开橡皮塞,迅速挂于橡皮塞的力物上>塞好塞子(加样操作时>应设法防止室内空气和口中呼岀的气体进入瓶内人开始记录时间。经30min.苴间轻轻摇动数次■使濬液表面的BaCO,薄膜破碎,有利于CO】的充分吸收。到预定时间后>轻曲开瓶塞,迅速取出小筐'立即重新塞紧-充分摇动2min,使瓶中CQ完全被吸收,拔出小橡皮塞‘加入酚駄3滴,用草酸滴定如前。记下草酸用量「即为样品備定值。4.取岀广口瓶中的小麦种子「于80乜烘箱中烘干并称取干重°5•计算呼吸速率(空白備定值-样品關定值)
5、x吨CO“ml草酸呼吸J&=植物组织鲜重(或干重)X时间(h)呼吸速率的单位-<可采用mgCO:・名】鲜重・h气式中滴定值以ral计,mgCOJral苴:酸=1。二、不同状态植撫中子呼吸速率的比较1.用前面描述过的大小一致的广口瓶3个(可三个实验小组合作人按步骤3s4分别测定以下材料的呼吸期。(1)吸胀的小諭子100粒;(2)萌动的小樹子100粒;(2)芽长0.5cm左右的小諭子100粒。根据测定结果「按上式计算以鲜重(或干重)为单位的呼吸速率。同时按下式计算毎100粒小轰种子lh内放出的CO】亳克数。(空白滴定值-样品滴定值brngCO,mlg:酸呼吸速率=测定时间(h)呼吸
6、速率单位为mgCO:・100粒】种子・hJ1-1-把不同处理的测走结果记入表10-1,并加以解释,比较用三种不同单位所表示的种子呼圾速率的差异。^10-1呼哦運电测定记兹表浪恆日期=处村轴屋腐豊方改叱J站恫min空白個ml萌动2(种尹芽长30.5cm【注盍事项】实验课中人数多'室内空气中CO】浓度不断升高,是本踽最大的误差来源。若先做样本测定,后做空白滴定>测定结果甚至出现负值。克服的办法可将广口瓶装满水「I迎风处将水倒浄>换上室外空气(若用自来水,还应用无co:蒸懾水或煮沸过的冷开水洗涤广口瓶),塞好橡皮塞带回室内进行加液.滴定等操隹进行样本测定时也可在室夕隔装有萌卿子的小筐
7、挂入瓶中'并开始记时。操作要注意勿便口中呼出的气体进入頫中.【思老題]I•漁足呼吸速率有何遨汽?2.唄陛因子能影响呼吸速率?3•在呼吸速率测定中那些歩骤容易出现误差?应怎样避免。a•广d瓶橡皮塞上加一破石灰管有何作用?实验十一植物体内可溶性蛋白质含量的测定作者:來源:本站时间:2006-2-15植物体内的可濬性蛋白质大多数是参与各种代谢的舘类,测苴含量是了解植物体总代谢的一个重要指标口在研究毎一种勺作用时,常以比活(酶活力单位/吨蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此,测定植物体内可溶性蛋白
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