10种形态相似川茶花品种的分子鉴定【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）10种形态相似川茶花品种的分子鉴定目录1引言12材料与方法22.1样品采集22.2实验设备22.3DNA提取22.4引物筛选与ISSR反应条件33结果与分析33.1ISSR引物的筛选33.2扩增产物的多态性43.3品种鉴定43.3.1氅盔和吊金钟的分子鉴别43.3.2胭脂莲、胭脂鳞、鱼鳞甲的分子鉴别53.3.3泸州大红和泸州二红的分子鉴别73.3.4红佛鼎、似紫冠以及紫金冠的分子鉴别84讨论95小结10致谢10参考文献11摘要：本实验采用ISSR分子标记技术，对重庆南山植物园中花色花型极其相似，从外部形态上难

2、以区分的10个川茶花品种进行了分子鉴定。从23条引物中筛选出了5条谱带清晰、重复性好的引物用于PCR扩增，共得到72条清晰条带，其中64条呈现多态性，多态性比例(P)为88.89％。利用5条引物所建立的DNA指纹图谱可以较好地区分出这10个茶花品种，除了似紫冠和紫金冠。实验结果表明ISSR分子标记具有丰富的遗传多样性和稳定性，是一种较好的遗传分子标记，适合用于茶花品种的鉴定。关键词：山茶；品种；分子鉴定；ISSRAbstract:Inthepresentstudy,ISSRmarkershavebeusedtomolecularlyi

3、dentified10SichuancamelliaspeciesofBotanicalGardeninNanshanChongqing,whichareverysimilarincolorandpattenandindistinguishablefromtheexternalmorphology.5primerswhichhavedistinctandwell-separatedbandswerescreenedfrom23primersusedforPCRamplification.Andrevealed72clearbands,

4、ofwhich64werepolymorphic,accountingfor(88.89%).TheDNAfingerprintingestablishedbythese5primerscanwelldistinguishthe10camelliaspeciesexcepttheSiziguanandZijinguan.TheresultofexperimentshowthatISSRhasaextensivegeneticdiversityandstability,andisagoodgeneticmolecularmarkerfo

5、rspeciesidentificationinCamellia.Keywords:camellia;species;molecularidentification;ISSR1引言茶花(CamelliaJaponicaL.)为山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)常绿灌木或小乔木，是我国十大名花之一[1]。川茶花在中国茶花中独具一格，它树姿挺拔秀丽，叶片终年长青，严冬顶霜怒放，既可以盆栽观赏，又可以植于街边路旁美化环境。川茶花开花时，花朵或洁白如云，或红花似火，单瓣清纯委婉，重瓣交叠生姿，平瓣落落大方，曲瓣高歌狂舞，深受

6、人们的喜爱。过去我们把川茶花归属在华东山茶品系中。已故上海著名园艺家黄德邻老先生有一个著名论断：“中国茶花起源于青藏高原，后来分南北两支，南支发展为云南山茶，北支发展为四川山茶，此后四川山茶沿长江流域向东发展，又形成了华东山茶。这样就形成了四川山茶、云南山茶和华东山茶三大体系。”也就是说中国的山茶是以川茶为主的长江流域的山茶种，古名为“川茶”或“蜀茶”，它是同我国的“滇茶”同出源于世界的屋脊—青藏高原。世界茶花最集中的产地是在中国，千万年来中国这个山茶种逐渐地沿长江，由上游向下游传播开来，直至东海诸岛屿，例如人们看到的舟山茶林。中国山

7、茶种在千百年前已自然形成了多色多型的重瓣种。在四川，我们的祖先早就把它们种植在庭院里，作为高贵的观赏植物，后来又经过前人的长期栽培成为当今世界上最古老的，但又是进化了的名贵中国“川茶”种[2]。总的来说，川茶花、华东茶花和一些日本茶花都叫日本山茶，但簇叶稍有不同。川茶花的叶片椭圆形，圆满而略呈卵状，光滑而有光泽，叶脉的网状不很明显，叶边呈小锯齿状。日本茶花虽然也呈椭圆形，但叶端有尖顶，叶面不光滑，叶脉网状明显，叶边锯齿形。川茶花和华东茶花也有所不同。华东茶花的叶片较薄有光泽，主脉、侧脉及网脉细腻明显，锯齿细尖锐。四川什邡茶花协会老会长

8、、川茶花专家徐永才先生在《川茶花品种及其演进》一文中对川茶花的特点说得更清楚。他说：“茶花在四川立地条件的长期影响下，形成了川茶花的明显特征：1、较外地茶花生长缓慢，节间短，着叶密集；2、叶片以椭圆形和卵圆形为主，很少见