凝溶胶蛋白对胃癌细胞的影响【开题报告+文献综述+毕业设计】

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1、本科毕业论文系列开题报告食品质量与安全凝溶胶蛋白对胃癌细胞的影响一、选题的背景与意义真核细胞的细胞骨架由微管、微丝和中间纤维构成。肌动蛋白(actin)是微丝的主要构成成分。微丝参与细胞形态和极性的维持、内吞作用、胞内运输、细胞收缩及运动、细胞分裂等众多功能。而肌动蛋白结合蛋白(actinbindingproteins，ABPs)则在肌动蛋白纤丝聚合及解聚的动态变化中发挥重要的调节作用。纽虫的体壁肌肉中含有大量的肌动蛋白和凝溶胶蛋白。凝溶胶蛋白(gelsolin)则是一种重要的肌动蛋白结合蛋白，最早于1979年由Yin和Stossel在兔肺巨噬

2、细胞中发现，证实其能以钙依赖的方式调节肌动蛋白的重组，促使细胞质gel-sol的相互转换。Gelsolin通过对微丝的剪切、封端和成核作用，来实现对细胞微丝骨架的动态调节，推测过表达的gelsolin可以通过调控神经细胞内肌动蛋白网络来影响轴突的起始、发生、伸长和树突的形成，从而增加神经元的长度，加快神经元的生长，从而促进外伤、截肢等患者的离断神经的修复。另外，推测gelsolin对肌肉的收缩和肌原纤维的装配起重要作用。成肌纤维细胞(myofibroblast)是伤口愈合和各种组织纤维化中起主要作用的细胞，成肌纤维细胞不能及时从病变处退出，使细

3、胞外基质持续过量分泌，并发生重塑是组织纤维化的主要特征。Actin作为肌肉细胞的一个重要的收缩蛋白，也是构成细胞骨架的主要成分，其表达量的多少能直接反应成肌纤维细胞的分化、增值及凋亡情况，而gelsolin又在肌动蛋白纤丝聚合及解聚的动态变化中发挥重要的调节作用，因此研究gelsolin对成肌纤维细胞的功能性作用具有重要的理论意义，通过分子生物学技术阻断其分化、增殖的信号通路及基因转录，通过药物或重组蛋白促进成肌纤维细胞的凋亡，抑制其分化和增殖，促其恢复转化前细胞表型，从而阻断纤维化进程，根治组织纤维化疾病。无序生长和高迁移能力是转移性癌细胞的

4、重要特征，而这两个过程都涉及到细胞肌动蛋白骨架的解聚与重排，而gelsolin作为胞质内重要的actin调节蛋白也与肿瘤的发生和发展有着密切的关系。已报道gelsolin在人类多种恶性肿瘤中表达明显降低，其表达水平与肿瘤大小、侵袭性生长等密切相关，如在人膀胱癌中，gelsolin在6个膀胱癌细胞系和77.8%的膀胱癌组织中表达缺失和明显降低。在乳腺癌中，gelsolin在乳腺癌细胞系中缺失或明显低于正常人乳腺上皮细胞和良性永生化细胞的表达水平。人们对gelsolin在肿瘤中表达明显降低的现象进一步进行了深入研究，发现将外源gelsolincDN

5、A全长转入癌细胞系过表达后，可抑制肿瘤细胞的生长，降低肿瘤细胞的集落形成能力和裸鼠致瘤性。这些实验证据提示gelsolin具有明显的肿瘤抑制作用。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：1、胃癌细胞的培养。2、重组凝溶胶蛋白的诱导表达、Ni柱纯化和冷冻干燥。3、凝溶胶蛋白对胃癌细胞功能性作用和作用的机制的研究，包括：凝溶胶蛋白对胃癌细胞形态变化的影响对细胞迁移运动情况的影响对胃癌细胞有丝分裂情况的影响。重组凝溶胶蛋白三、研究的方法与技术路线：培养胃癌细胞诱导表达、纯化和冷冻干燥gelsolin对胃癌细胞作用有丝分裂情况迁移运动情况细胞形态的变化四

6、、总体安排与进度：2010.10-2010.11：查阅文献，了解实验总体步骤与方法。2010.11-2010.12：重组凝溶胶蛋白的制备；以及胃癌细胞的培养。2010.12-2011.03：凝溶胶蛋白对胃癌细胞的影响。2011.03-2011.05：对整个试验的补充、完善阶段，论文的撰写。五、主要参考文献：1韩晓曦，王继红，李庆伟.凝溶胶蛋白的结构与功能[J].中国生物化学与分子生物化学报，2007，23（5）：331~337.2王旭涛，张新超.凝溶胶蛋白和危重病[J].ChineseGeneralPractice，2009，12（11）：20

7、88~2091.3倪晓光.凝溶胶蛋白的结构和功能及其抑制肿瘤的作用[J].实用癌症杂志，2007，22(1):105-107.4汪勇沛，詹永乐.日本血吸虫凝溶胶蛋白基因在虫体不同发育阶段的转录水平分析.上海畜牧兽医通讯，2010，1:48-49.5潘有福，王新宇，张大伟，等.烟草花粉母细胞减数分裂前期Ⅰ肌动蛋白的免疫细胞化学定位[J].实验生物学报，2000，33(3):273-281.6孟宪敏，曹慧青，王震等.Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选[J].科学通报，2004，49（21）：2173~2177.7江奇峰，蔡绍皙，

8、晏小清，等.钙调蛋白结合蛋白及其磷酸化对癌细胞迁移能力的影响研究[J].生物化学与生物物理进展，2010，37(3):326-336.8徐国恒.细胞骨