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时间:2020-01-11
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1、十、常用蛋白质分子量标准参照物高分子量标准参照中分子量标准参物低分子量标准参照蛋白质Mr蛋白质Mr蛋白质Mr肌球蛋白β-半乳糖苷酶磷酸化酶B牛血清清蛋白过氧化氢酶醛缩酶21200011600097400662005700040000磷酸化酶B牛血清清蛋白谷氨酸脱氢酶卵清蛋白醛缩酶碳酸酐酶大豆胰蛋白酶抑制剂溶菌酶9740066200550004270040000310002150014400碳酸酐酶大豆胰蛋白酶制剂马心肌球蛋白溶菌酶肌球蛋白(F1)肌球蛋白(F2)肌球蛋白(F3)310002150016900144008100620
2、02500十一、层析法常用数据表及性质(一)离子交换纤维素目前常用的离子交换纤维素列于下表DEAE-纤维素形状长度(微米)交换当量(毫克当量/克)蛋白吸附容量(毫克/克)床体积(毫升/克)胰岛素(pH8.5)牛血清清蛋白(pH8.5)pH6.0pH7.5DE-22DE-23DE-32DE-52CM-纤维素CM-22CM-23CM-32CM-52改良纤维性*同上(除细粒)微粒性(干粉)同上(溶胀)改良纤维性同上(除细粒)微粒性(干粉)同上(溶胀)12~40018~40024~6324~6312~40018~40024~6324~63
3、1.0±0.11.0±0.11.0±0.11.0±0.10.6±0.060.6±0.061.0±0.11.0±0.1750750850850溶菌酶(pH5.0)6006001,2601,2604504506606607S-γ球蛋白(pH5.0)1501504004007.78.36.06.0pH5.07.79.16.86.87.79.16.36.3pH7.57.79.16.76.7*:英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量
4、仅为130毫克/克。(二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据型号排阻的下限(Mr)分级分离的范围(Mr)膨胀后的床体积(mL/g干凝胶)膨胀所需最少时间(室温,小时)Bio-gel-P-2Bio-gel-P-4Bio-gel-P-6Bio-gel-P-10Bio-gel-P-30Bio-gel-P-60Bio-gel-P-100Bio-gel-P-150Bio-gel-P-200Bio-gel-P-300160036004600100003000060000100000150000200000300000200~2000500~400010
5、00~50005000~1700020000~5000030000~7000040000~10000050000~15000080000~300000100000~4000003.85.88.812.414.919.019.024.034.040.02~42~42~42~410~1210~1224244848注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-RadLaboratories,Rich-mond,California,U.S.A.(三)琼脂糖凝胶的技术数据(琼脂糖是琼脂内非离子型的
6、组分,它在0~4℃,pH4~9范围内是稳定的。)名称、型号凝胶内琼脂糖百分含量(W/W)排阻的下限(Mr)分级分离的范围(Mr)生产厂商Sagavac10Sagavac8Sagavac6Sagavac4Sagavac21086422.5×1057×1052×10615×106150×1061×104~2.5×1052.5×104~7×1055×104~2×1062×105~15×1065×105~15×107SeravacLaboratories,Maidenhead,EnglandBio-GelA-0.5MBio-GelA-1.
7、5MBio-GelA-5MBio-GelA-15MBio-GelA-50MBio-GelA-150M10864210.5×1051.5×1065×10615×10550×106150×106<1×104~2.5×106<1×104~1.5×1061×104~5×1064×104~15×1061×105~50×1061×106~150×106Bio-RadLaboratories,California,U.S.A.(四)凝胶过滤层析介质的技术数据凝胶过滤介质名称分离范围颗粒大小(μm)特性/应用pH稳定性工作耐压(Mpa)最快流速(
8、cm/h)Superdex30Superdex75Superdex200Superose6Superose12SephacrylS-100HRSephacrylS-200HRSephacrylS-300HRSephacrylS-400HRSepha
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