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1、改进的蒽酮法检测肺炎链球菌荚膜多糖结合物中多糖浓度?536?中国生物制品学杂志2007年7月第2O卷第7期ChinJBiologicalsJuly2007,Vo1.20No.7中国图书分类号11378.+411392-33文献标识码A文章编号1004-5503~2OO7)o7-$36-o4【实验技术】改进的葸酮法检测肺炎链球菌荚膜多糖结合物中多糖浓度吴凯代泽友马波周燕美吴绍学樊会兰黄镇【摘要】目的改进检测肺炎链球菌荚膜多糖结合物中多糖浓度的蒽酮法.方法分别对蒽酮法中蒽酮的浓度和处理温度进行优化,并对改进的方法进行验证和重复性检测
2、.结果适宜的蒽酮浓度为0.3g/3ooml,处理温度为4
3、D℃,在检测肺炎链球菌多糖结合物原液中的多糖浓度时,标准曲线回归系数高,方法稳定,重现性好.结论改进的蒽酮法可以有效,准确,稳定地检测肺炎链球菌结合物多糖原液中的多糖浓度.【关键词】肺炎链球菌;多糖结合物;蒽酮法;多糖浓度AImprovedAnthroneColorimetryforDeterminationofPolysaccharideConcen-trationinStreptococcuspneumoniaeCapsularPolysaccharideConjug
4、ateWUKai,DAIZe—you,MABo,etal(yn,nWalvaxBiotechCo.Ltd,Kunming650106,China)【Abstract】ObjectiveToestabhshallimprovedanthronecolorimetryforthedeterminationofcapsularpolysaccharideconcen—trationinStreptococcuspneumoniaepolysaccharideconjugate.MethodsOptimizetheanthronecon
5、centrationandtemperature,verifytheimprovedanthronecolorimetryandtestforitsreproducibility.ResultsTheoptimalanthroneconcentrationandtemperatureforanthronecolorimetrywere0.3g/3oomland40℃respectivelyTheregressioncoefficientofstandardcurvefordeterminationofpolysac—charid
6、econcentrationinbulkofStreptococcuspneumoniaepelysaccharideconjugatebytheimprovedanthronecolorimetrywashish.ThemethodshowedgoodstabilityandreproducibihtyConclusionTheimprovedanthronecolorimetrywaseffective,accurateandstablefordeterminationofpolysaccharideconcentratio
7、ninbulkofStreptococcuspneumoniaepolysaccharideconjugate.【Keywords】Streptococcuspneumoniae;Polysaccharideconjugate;Anthronecolorimetry;Polysaccharideconcentration肺炎链球菌多糖结合物原液中的多糖浓度是肺炎链球菌多糖结合物质量控制的重要指标之一.目前检测肺炎链球菌多糖结合物中多糖浓度的常用方法为蒽酮法,也是《中国药典》三部(2005版)规定的方法.然而应用此方法进行检测时,
8、因受试剂,温度,标准曲线回归系数低,方法稳定性差等因素的影响,结果重现性不好.为此,本文对蒽酮混合液的配制浓度和处理温度进行了优化,改进后的蒽酮法检测肺炎链球菌多糖结合物中多糖浓度准确,稳定.现将结果报道如下.材料与方法1.试剂葡萄糖标准品为Fluka公司产品;蒽酮为国药集团化学试剂有限公司产品;浓硫酸和无水乙醇为汕头达濠精细化学品有限公司产品;氯化钠注射液为云南宏泰制药有限公司产品.作者单位:l云南沃森生物技术有限公司(昆明650106);2玉溪沃森生物技术有限公司(玉溪653100).通讯作者:黄镇,E—mail:walva
9、xhuangzhen@126.corn2.肺炎链球菌多糖结合物原液Pn4ps一][][2c0(,Pn6Bps?Tr2006~04,Pnl8Cps—T120IX~08和Pnl9Fps-1”120060403均由云南沃森生物技术有限公司制备.3.蒽酮混合液的配制A,
