核磁共振氢谱对群肺炎链球菌荚膜多糖的结构分析

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1、核磁共振氢谱对6群肺炎链球菌荚膜多糖的结构分析  [摘要]目的对6群型肺炎链球菌荚膜多糖进行结构分析。方法应用分子生物学方法将6群肺炎链球菌分为6A型、6B型、6C型和6D型,提纯其荚膜多糖,并采用核磁共振氢谱(1HNMR)对6群肺炎链球菌荚膜多糖的结构进行分析,比较6A型、6B型、6C型和6D型多糖结构1HNMR谱的端基质子区和环质子区化学位移的差异。结果6A型谱图中,三个特征质子峰化学位移值分别为?啄5.62、?啄5.13和?啄5.05;6C型谱图中,三个特征质子峰化学位移值分别为?啄5.59、?啄5.13和

2、?啄5.05;6B型谱图中,三个特征质子峰化学位移分别为?啄5.62、?啄5.17和?啄5.15;6D型谱图中,三个特征质子峰化学位移分别为?啄5.59、?啄5.17和?啄5.15。6A、6B、6C和6D型的环质子区(?啄4.40~3.30)化学位移表现出不同的位移特性。结论获得6A型、6B型、6C型和6D型肺炎链球菌荚膜多糖1HNMR谱图,其端基质子区和环质子区化学位移存在差异,为荚膜多糖质量控制提供基础[关键词]肺炎链球菌荚膜多糖;核磁共振氢谱;端基质子;环质子;化学位移[中图分类号]R914[文献标识码]A

3、[文章编号]1674-4721(2016)10(b)-0016-04[Abstract]ObjectiveToanalyzethestructuresofthecapsularpolysaccharidesfromstreptococcuspneumoniaeserogroup6.MethodsSerotypesofstreptococcuspneumoniaweredeterminatedas6A,6B,6Cand6Dusingthemolecularbiologicaltechnologies,thenthe

4、capsularpolysaccharideswereextractedandthestructureswereanalyzedby1Hnuclearmagneticresonance(NMR).Thechemicalshiftsofanomericprotonregionsandringprotonregionsof1HNMRspectrumswereanalyzedandcomparedamongdifferentserotypesofcapsularpolysaccharides.ResultsTheche

5、micalshiftsofallcharacteristicprotonspeaksofthepneumococcalcapsularpolysaccharidesserotype6Awere?啄5.62,?啄5.13and?啄5.05separately;serotype6Cwere?啄5.59,?啄5.13,and?啄5.05;serotype6Bwere?啄5.62,?啄5.17and?啄5.15;serotype6Dwere?啄5.59,?啄5.17,and?啄5.15.Thechemicalshifts

6、ofringprotonregions(?啄4.40-3.30)of4serotypesweredifferent.ConclusionThe1HNMRspectrumsofpneumococcalcapsularpolysaccharidesserotype6A,6B,6Cand6Dweredeterminated,andthechemicalshiftsofanomericprotonregionsandringprotonregionsweredifferentineachserotype.Itprovid

7、esdataforthequalitycontrolofdifferentcapsularpolysaccharide.[Keywords]Pneumococcalcapsularpolysaccharide;1HNMR;Anomericproton;Ringproton;Chemicalshift肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)是严重威胁人类健康的常见病原菌之一,能够引起肺炎、急性呼吸道感染、中耳炎、脑膜炎和菌血症等侵袭性和非侵袭性疾病。根据世界卫生组织(WorldHealthOrg

8、anization,WHO)报道,在发展中国家每年约有160万例死于肺炎链球菌感染,其中100万例是  本研究根据6群荚膜多糖合成相关基因序列和文献报道[15],应用分子生物学技术在分子水平上鉴定6群肺炎链球菌的血清型,并且根据NMR可通过对多糖分子特异基团上特征质子的检测,获得6A、6B、6C和6D型肺炎链球菌荚膜多糖1HNMR图谱,为肺炎链球菌荚膜多糖的质量控制提供依

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