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《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定曦仔》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验背景资料1.该实验是高中阶段生物课程的第一个实验。从此以后生物化学方面的内容增加。本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础，一定要强调规范化操作方法。2•低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能，学生经初三、高一两年的搁置，已显生疏。实验时教师可考虑予复习,或通过演示提醒学生,注意规范操作要领。3•本实验难度并不大，但由于内容较多、实验时间长，必须作周密安排才能完成。如实验中教师应做好学生的分工合作可缩短实验时间。同时又能培养学生的合作精神。4.培养学生主动获取知识，应用知识
2、分析现象，归纳总结的能力，培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。5.通过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度，培养实事求是的世界观。6.实验内容较多，实验时间长，必须周密安排，才能按时完成。学生要分工合作、教师指导演示。二实验原理1.可溶性还原糖鉴定原理生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩轻基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。斐林试剂为一定浓度的氢
3、氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色Cu(0H)2沉淀的悬浊液,葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件下还原为砖红色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为:CH20H—(CH0HH)4—CHO+2Cu(OH)2->CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为；浅蓝色-棕色-砖红色沉淀2脂肪鉴定原理苏丹皿（苏丹IV）为一种脂肪染色剂（易溶解于酒精，不溶解于水）。苏丹HI染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹IV染液遇脂肪的颜色反应为红色。其反应式为：苏丹m（苏丹IV）为一种脂肪染色剂
4、（易溶解于酒精，不溶解于水）。苏丹ni染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹iv染液遇脂肪的颜色反应为红色。其反应式为：橘黄色红色3.蛋白质鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩腺法，使用的是双缩腺试剂。双缩腺试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液（NaOH）中，双缩瞰H2NOC—NH—CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩腺反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩腺结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩腺试剂发生颜色反应。三、
5、实验器材及器具1•实验材料：（1）还原糖:在做可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。官）,而且组织的颜色较浅,好是白色或近于白色的植物组织，这样可以避免材料自身颜故选用苹果作为实验材料。但要注意，苹果组织液必须临时制备，切勿保存时间过长。因为苹果多酚氧化醃含量较高，组织液很容易被氧化成褐色，将反应产生的颜色覆盖。温度高时，氧化的速度更快。而梨和白心萝卜的组织液不会有这种现象出现。双子叶植物光合作用的主要产
6、物为淀粉,其叶不理想。有些单子叶植物,如韭菜、莺尾等,其叶内含有大量的可溶性单糖,但由于叶片中叶绿素颜色较深，影响鉴定时实验现象的观察，也不宜作实验材料。(2)脂肪实验材料最好选用富含脂肪的种子,且徒手切片要成功,要求实验技能较高,不妨改成刮取花生子叶泥制作临时装片，易做，效果又好。(3)蛋白质最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋,鉴定之前需要留岀一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色做比较，这样可增强说服力。鸡蛋清：蒸懈水=1:9混合均匀,再用4层纱布过虑，放入滴瓶中备用,这样配制的蛋清溶
7、液与双缩腺试剂反应后不会粘固在试管内壁上，反应也彻底，试管也容易洗刷干净。也可以用浓豆浆代替蛋清溶液。1.实验药品：(1)斐林试剂：甲液氢氧化钠的质量浓度O.lg/ml的溶液乙液硫酸铜的质量浓度0.05g/ml的溶液使用时临时配制，将4滴~5滴乙液滴入2ml甲液中，配完立即使用。与斐林试剂原理一样的本尼迪试剂配制后可长久保存，配方如下：无水硫酸铜1.74g溶于100ml热水中冷却后加至150ml。取柠檬酸钠173g,无水碳酸钠100g和600ml水共热,溶解后冷却并加水至850ml。再将冷却的150ml硫酸铜溶液倾入即可。(
8、2)苏丹III溶液的配制称取O.lg苏丹IIIz溶于50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml即可使用。(3)苏丹IV溶液的配制称取0.1g苏丹IV干粉，溶于50mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精50mL,充分混合后即可使用。(4)双缩腺试剂的配制:取10g氢氧化钠放入量筒中,加水至1
