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《松木层孔菌粗多糖提取工艺的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、松木层孔菌粗多糖提取工艺的研究吴恒梅I李秀霞I张丽萍2（1佳木斯大学牛命科学学院，黑龙江佳木斯1540072东北师范大学生命科学学院吉林长春130024）摘要：对松木层孔菌发酵菌丝体多糖的提取工艺进行了研究，通过单因素试验和正交试验L9（33）,研究了提取次数、浸液比和提取时间对多糖提取率的影响，结果显示提取次数、浸液比和提取时间是影响多糖提取率的主要因素，最佳工艺为提取温度常温，提取3次，每次浸液比（质量比）1:30,时间是lh。各因素影响大小的次序是：提取次数〉浸液比＞提取时间。关键词：松木层孔
2、菌；可溶性多糖；提取工艺0引言多糖（Polysaccharide）是由许多相同或不同的单糖通过糖甘键连接而成的化合物，其分子量一般为数万甚至数白万山。多糖具有免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、降血糖血脂、利尿和抗溃疡等生物活性作用。松木层孔菌又名为松针层孔菌、松白腐菌（Phellinuspint）,隶属于担子菌亚门、层菌纲、多孔菌目、多孔菌科、层孔菌属。王稳航［2】首次从松木层孔菌子实体捉収多糖进行了抗氧化性研究。结果表明，多糖抗氧化效果较好，对超氧阴离子自由基的清除率均达到90%以上，W二醛生成抑制率均达
3、到65%左右。
4、=
5、前从松木层孔菌屮提取粗多糖工艺的研究还鲜见报道，近年来对多糖提取工艺的研究方法较多如热水提取法、稀碱液提取法、稀酸液提取法，本文采用稀碱液提取法。通过对发酵菌丝体水溶性多糖碱提工艺的研究，以其获得一种松木层孔菌发酵菌丝体多糖提取率较高的工艺，获得最优化的工艺参数，希望为工业化生产研究有所帮助。1材料和方法1.1材料松木针层孔菌IPhcllinuspini.）菌丝体的获得:松木层孔菌子实体采自长白山，从松木层孔菌了实体中分离菌种，取活化后的斜面母种接入500ml锥形瓶中，28°C,
6、MOr-min'1培养7d,发酵结束后,4000rpm离心收集新鲜菌丝体,烘干备用。1.2方法1.2.1粗多糖的提取与分离（以去除水提水溶多糖⑻的菌丝体残渣为材料）经水提的菌丝体残渣，烘箱干燥，称取5克干燥的松木层孔菌菌丝体，然后加入0.5mol/LNaOII溶液,在一定温度下进行一定时间的提取，反复提取3次，合并提取液经过过滤，加Hcl屮和，在水浴锅屮浓缩至小体积，得浓缩液,透析，用3倍体积97%（质量分数）乙醇醇析得水溶性粗多糖沉淀，低速离心机离心，转速3500转，离心10分钟,弃去上清液，沉淀
7、用无水乙瞇洗涤2次，真空干燥后，得碱提水溶性粗多糖的产品。1.2.2多糖含量的测定(苯酚-硫酸法)本实验先用标准葡萄糖溶液在490mn处的吸光度处制标准川
8、线。精确称取碱提水溶性多糖5mg,定容至50ml糖溶液,然后取干燥洁净试管,将0.lmg/ml糖溶液，6%的酚溶液，浓HzSOj依次按1:0.5:2.5的比例加入、振荡、摇匀、冷却、静止，每个样品平行做三管，蒸馆水作对照，然后在490nm波长下比色，所得数值取平均值，查标准曲线可得总糖含量。2结果和讨论2.1多糖含量的测定在实验条件下，以浓度(C
9、)为横坐标，以吸光度(A)为纵坐标作图，得标准曲线。2.2提取次数、浸液比和提取时间单因素对松木层孔菌可溶性多糖提取率的影响⑺碱提涉及三个关键条件：提取次数、浸液比和提取时间。提取次数采用1次、2次、3次、4次、5次五个水平；浸液比(干燥样品的质量与水的质量之比)采用1：10、1：20,1：30、1：40和1：50五个水平，提収时间采用lh、2h、3h、4h和5h五个水平分别进行单因素试验。2.2.1提取次数的影响不同的提取次数对水溶性多糖提取率的影响，提取次数的上升会增加碱提水溶性多糖的含量，在提
10、取3次后多糖含量增加的幅度不人，趋于平缓。2.2.2浸液比的影响不同的浸液比对水溶性多糖提取率影响。试验结果显示:浸液比的增加会使水溶性多糖的含量增加，随浸液比的增加，碱提水溶性多糖含量也逐渐增大，在浸液比1:30后，多糖含量增大幅度减小。2.2.3提取时间的影响不同提取时间对水溶性多糖提取率的影响。试验结果表明：提取时间在0-2h内，提取液屮的多糖含量上升幅度较大，而2-4h以后含量稍有上升。所以最佳提取时间为3ho2.3碱提松木层孔菌屮水溶性多糖提取率的正交试验2.3.1正交试验设计和结果分析⑻
11、以碱提水溶性多糖的含量为标准，选择影响提取菌丝体多糖产量的三个主耍因素：提取时间、提取比(质量比)、提取次数，每个因素设3个水平，选用L9(33)正交试验，因素水平见表1、试验结果计算及分析见表2。表1正交实验的因素及水平水平因素A提取次数B浸液比C提取时间(h)111:100.5221:201331:302从表2可知,捉収次数是影响水溶性多糖提取率的最关键因素，其次是提収时间，在实验范围内，浸液比的影响最小。2.3.2正交试验的方差分析结果正交试验的方差分析结果如表
