8第二章提取分离和鉴定的方法和技术

《8第二章提取分离和鉴定的方法和技术》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、枣庄科技职业学院教案【8】周次第三周，第2-3次课备注章节名称第二章§2五、六、七授课理论课（丿）；实验课（）；教学2方式实习（）时数1.掌握柱色谱的操作要点2.掌握硅胶吸附色谱及聚酰胺色谱的原理及操作要点教学重点与难点重点:柱色谱的操作要点难点：硅胶吸附色谱及聚酰胺色谱的原理及操作耍点教学内容备注第二章§2分离精制和鉴定的方法和技术五、透析法小分子物质（无机盐、氨基酸等）在溶液屮可通过半透膜，而大分子物质如多糖、蛋白不能通过半透膜的性质达到分离的方法。六、盐析法水提液中，加入无机盐至饱和，有效成分沉淀析出，其它水溶性杂

2、质溶于水。如：三七的水提液中加硫酸镁一三七皂试乙1三颗针中提取小槃碱一氯化钠或硫酸钱盐析。七、色谱法1•定义：是一种依据物质的物理化学性质（如极性、溶解性、离子交换能力、分子大小等）的不同而进行分离分析的方法。2•基本原理：是利用混合物小各成分在固定相和移动相中吸附力、分配及其亲和力的差异而达到分离。3.分类：（1）按移动相种类的不同分为：气相色谱和液相色谱（2）按操作方式的不同分为：柱色谱、纸色谱和薄层色谱（3）按色谱原理不同分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱(-)吸附色谱法物理吸附(physicalad

3、sorption):也称表面吸附，常见如硅胶、氧化铝、活性炭吸附。是目前吸附色谱最主要的分离依据。物理吸附基本规律一相似者易于吸附吸附三耍素：吸附剂、溶质、溶剂。常用的吸附剂有：硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺、大孔吸附树脂等。1.活性炭：是非极性吸附剂，对非极性物质具有较强的亲和力。吸附规律：%1芳香族化合物吸附力〉脂肪族化合物%1分子量大的化合物吸附力＞分子量小%1水中对溶质的吸附力〉有机溶剂中对溶质的吸附力2.硅胶、氧化铝：为极性吸附剂。(1)吸附原理：硅醇基与化合物形成氢键硅醇基与水形成氢键硅胶吸附的水分愈多，吸附其

4、他化合物的能力愈弱。吸水量超过17%,不能作为吸附剂了。在100〜110°C加热30min时即可除去水，恢复吸附活力，这一过程称为硅胶的活化。(2)吸附规律：%1对强极性物质的亲和力强于弱极性物质。%1溶剂极性弱，吸附剂对溶质吸附力强，溶剂极性增强，吸附剂对溶质吸附力弱。%1溶质被硅胶、氧化铝吸附，当加入极性较强的溶剂时，又可被后者置换洗脱下來。1.聚酰胺：屈于氢键吸附，不但适用极性物质也适用于非极性物质的分离。特别适合酚类、醍类、黄酮类、糅质的分离。2.大孔吸附树脂：大孔吸附树脂是一•种没有可解离基I才I具有大孔结构的

5、高分子吸附剂。分为非极性与中等极性两类。（1）吸附原理：吸附性与分子筛原理相结合的分离材料。（2）影响因素：大孔吸附树脂的特性、被分离物质及溶剂的性质均影响着分离结果。%1分子极性极性大成分——易被极性树脂吸附，被分离成分与大孔树脂形成氢键的基团越多，吸附力越强，极性大的有机溶剂合适。极性小的成分——易被非极性树脂附，极性小洗脱剂，洗脱能力强。%1分子体积对非极性大孔树脂而言，化合物体积越犬，吸附力越强，这与大体积分了的疏水性有关。%1溶液的pH酸（碱）性化合物——适当的酸（碱）性溶液中吸附；中性化合物——中性溶液中可被

6、充分吸附%1洗脱剂水、醇类、丙酮、乙酸乙酯等。（二）液•液分配色谱法（1）正相分配色谱：载体：硅胶（含水量超过17%已失去吸附性，可作为载体）、硅藻土、纤维素等固定相：强极性溶剂，如水、缓冲液等流动相：氯仿、乙酸乙酯等弱极性有机溶剂洗脱规律：极性小成分先洗下极性大成分后洗下（2）反和分配色谱：亲脂性有机溶剂——固定相水或亲水性溶剂——移动相固定相:可用石蜡油、反相硅胶RP-18>RP・8、RP-2流动相：则用水或卬醇等强极性溶剂洗脱规律：极性大成分先洗下极性下成分后洗下（三）离子交换色谱法酸性、碱性及两性基团的化合物在水

7、溶液中多呈解离状态，可以与离子交换树脂上的基团交换，从而与其它非解离性物质分开。应用:分离具有解离能力的酸性、碱性及两性化合物，如生物碱、氨基酸、有机酸、酚类、肽类等天然药物化学成分。（四）凝胶色谱法（也称分了筛滤过法、凝胶渗透色谱法）利用凝胶的三维网状结构的分了筛滤过作用使分了大小不同的物质得以分离。型号：葡聚糖凝胶（SephadexG—25）疑丙基葡聚糖凝胶（SephadexLH—20）洗脱规律：分子量大的成分先洗卜分子量小的成分后洗下讨论、练习、作业1.硅胶吸附色谱的原理及吸附规律是什么？2.聚酰胺色谱的原理及吸附

8、规律是什么？教学手段讲授+演示+讨论+提问参考资料1.吴剑峰，王宁.天然药物化学，北京：人民卫生出版社，2009.012.刘新，张须学.天然药物化学，西安：第四军医大学出版社，2007年3.吴剑峰.天然药物化学，北京：人民卫生出版社，2003年