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1、多糖的结构及常用的分析方法时嘉宏10200200921866摘要:多糖具冇多种生物学活性如抗病毒、抗肿瘤、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输等。并且研究表明,多糖的功能与其结构密切相关。对多糖结构的研究是其功能研究的基础,本文就多糖的结构及其常用的分析方法进行综述关键词:多糖结构、多糖结构分析方法多糖广泛存在丁真菌、海藻、植物、微生物和细菌屮,是所冇生物冇机体重要组成成分与维持生命所必须的结构材料。其中研究得较早且最多的,是从细菌中得到的各种荚膜多糖,它在医药上主要用于疫苗;冇关真菌多糖的研究既深
2、又广,如酵母菌多糖、食用菌多糖,特别是食用菌多糖的研究,报道的频率是相当的高,其中以香菇多糖研究得较清楚。植物多糖研究得比较深入是稻草多糖、麦秸多糖、竹多糖、黄茯多糖、刺五茄多糖,海藻多糖虽然研究得不多,但英前途也是很光明的。多糖的结构描述包括分子量范围、单糖的组成、连接点类型、m糖和糖昔键的构型及重复单元等。常'用的方法有高碘酸氧化、Smith降解、甲基化和部分酸水解及糖蛋白糖肽键型的测定方法等。1.多糖的结构1.1多糖的广义分类:均-•性多糖和不均-•性多糖。均-•性多糖:由-•种单糖分子缩合
3、而成的多糖,叫做均一性多糖。自然界中最丰富的均一性多糖是淀粉和糖原、纤维素。它们都是由葡萄糖组成。淀粉和糖原分别是植物和动物中葡萄糖的贮存形式,纤维素是植物细胞主要的结构组分。糖元与支链淀粉类似,只是分支程度更高,每隔4个葡萄糖残基便有一个分支。纤维索结构是曲许多葡萄糖分子以p-(l-4)糖昔键相连而成直链。淀粉是植物营养物质的一种贮存形式,也是植物性食物中重要的营养成分,分为直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是指许多«■葡萄糖以(x(l・4)糖营键依次相连成长而不分开的葡萄糖多聚物。典型情况下由数千个
4、葡萄糖线基组成,分了量从150000到600000。结构是长而紧密的螺旋管形。这种紧实的结构是与其贮藏功能相适应的。遇碘显兰色。支链淀粉是指在直链的基础上每隔20-25个葡萄糖残基就形成一个・(1・6)支链。不能形成螺旋管,遇碘显紫色。内切淀粉酶(a■淀粉酶)水解*1.4键,外切淀粉酶(卩■淀粉酶)a-1.4,脱支酶a-1.6o不均一性多糖:有不同的单糖分子缩合而成的多糖,叫做不均一多糖。常见的有:透明质酸、硫酸软骨素等。有一些不均一性多糖由含糖胺的重复双糖系列组成,称为糖胺聚糖(glycosam
5、inoglycans,GAGs),又称粘多糖。(mucopolysaceharides)>氨基多糖等。1.2多糖的结构分析多糖结构比蛋白质和核酸的结构更为复杂,可以说是最复杂的生物大分子。从化学观点来看,结构的复杂性无疑给寡糖链的结构测定和化学合成带来了很多困难。糖的结构分类沿用了蛋白质和核酸的分析方法。单糖是糖类的组成单元,单糖Z间脱水形成糖昔键,并以糖昔键线性或分支连接成寡糖和多糖。寡糖和多糖的结构也可分为一级、二级、三级、四级结构。多糖的一级结构是指糖基的组成、糖基排列顺序、相邻糖基的连接方
6、式、界头碳构型以及糖链有无分支、分支的位置与长短等。糖的一级结构非常复杂,再加上糖残基上可以连接硫酸基团、乙酯基团、磷酸基团、甲基化基团,这就更加剧了糖一级结构的复杂性。多糖的二级结构是指多糖骨架链间以氢键结合的各种聚合体。通常糖昔键冇两个可旋转的主链二面角:①(H1・C1・O1・C糖配基)、屮(C1・O1・C糖配基・H糖配基)。两个单糖若为1-6连接,则还有第三个可旋转的二面角o(O6-C6-C5-O5),解决寡糖二级结构关键在于确定①、屮、s的取值。多糖链一级结构的重复顺序,由于糖单位的轻基、
7、竣基、氨基以及硫酸基Z间的非共价相互作用,导致冇序的二级结构空间冇规则而粗人的构象,即是多糖链的三级结构。多糖的四级结构是指多聚链间非共价键结合形成的聚集体。2.多糖结构分析方法口前糖结构研究领域屮,传统的化学分析方法,包括高碘酸氧化、Smith降解、甲基化和部分酸水解等,是不可缺少的分析多糖精细结构的必备方法。通过这些化学分析手段和现代化的仪器分析技术的相互结合的方法,能够准确的获得多糖连接键的类型、比例和连接顺序等方面的信息。水解法:将多糖链通过完全水解分解为各个单糖,是分析多糖链组成成分的主
8、要手段。水解法包括完全酸水解、部分酸水解、乙酰解和甲醇解等。水解的难易程度与组成多糖的单-糖性质、单糖环的形状和糖昔键的构型有关。i般咲喃糖甘键较毗喃型易水解,0(型较卩型易水解,含有糖醛酸或氨基糖的多不易水解。水解试剂的不同会影响水解条件。水解Z后的多糖经屮和、过滤,可采用纸层析(PC)、薄层层析(TLC)、气相色谱法(GC)、液相色谱法(HPLC)和离了色谱法进行分析。多糖水解产生物GC分析,通常是先经衍生化处理成易挥发组成分,常采用的衍生化方法是硅烷基化和乙酰化处理。高效液相
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