巴戟天多糖的分级纯化及结构分析

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1、华南理工大学学报(自然科学版)第33卷第12期JournalofSouthChinaUniversityofTechnologyVol.33No.122005年12月(NaturalScienceEdition)December2005文章编号:1000-565X(2005)12-0029-043巴戟天多糖的分级纯化及结构分析何传波陈玲李琳郭祀远李冰(华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510640)摘要:对巴戟天多糖的柱层析分级纯化和一级结构进行了研究.采取热水浸提、乙醇沉淀的工艺获得巴戟天粗多糖MOHP

2、,经离子交换和凝胶柱层析得到了MOHP2Ⅰ,MOHP2Ⅱ,MOHP2Ⅲ和MOHP2Ⅳ4个组分,通过红外光谱、液相和气相色谱等分析手段对分级后的MOHP2Ⅰ和MOHP2Ⅲ进行了初步的结构分析.结果表明:MOHP2Ⅰ的单糖组成为葡萄糖和果糖,分子质量约为2ku,呋喃糖环结构;MOHP2Ⅲ是一种均一的糖蛋白物质,其组成单糖为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、果糖以及半乳糖,分子质量约为35ku;高效凝胶渗透色谱显示两组分均达到了较高的纯度.关键词:巴戟天多糖;纯化;结构分析中图分类号:Q282.7文献标识码:A糖类是除蛋白

3、质和核酸外的另一类重要的生物天的开发应用还仅仅局限于粗加工阶段,尚未对其大分子,不仅是生物有机体的重要结构成分,而且有中具有药理活性的成分进行系统研究.本文中以巴研究证据表明糖类作为一类信息物质参与有机体分戟天为原料,采用柱层析方法对其中的多糖成分进子识别和细胞识别,在受精、发生、发育、分化、神经行分级纯化,并对其结构进行初步研究.系统和免疫系统衡态的维持等方面起着重要作用.目前已有300种多糖类化合物从天然产物中被分离1试验部分提取出来,其中从植物中,尤其是从中药中提取的水1.1仪器与试剂溶性多糖最为重要

4、.巴戟天(MorindaofficinalisHow)三年生正品,巴戟天(MorindaofficinalisHow)属于茜草科购自广东德庆.DEAE2SepharoseCL-6B和葡聚糖[1]Rubiaceae植物,是一种具有多种药理活性的名贵凝胶SephadexG-100均购自瑞典Phamacia公司;中药.我国巴戟天主产区是广东省的德庆县和高要bluedextran系列多糖为Fluka产品;三氟乙酸、六甲县,此外在福建西南部、广西东南部和海南省也有分基二硅胺烷和三甲基氯硅烷购自上海化学试剂公布.对于巴

5、戟天长期以来产地民众有“与肉煲食”的司;各种单糖标准品均购自上海试剂二厂,其它试剂食用习惯.现代研究表明巴戟天含有丰富的营养成均为分析纯.分,如维生素C、糖分和胶质,以及人体所需的其它LEAD-1蠕动泵(保定兰格恒流泵有限公司生一些有机物质,是值得开发的绿色保健食品,可用于产),BSZ-100自动部份收集器(上海沪西分析仪滋补保健品中,如已开发出的“巴戟乌鸡精”、“巴器厂生产),RE-52AAA旋转蒸发仪(上海嘉鹏科[2]戟黑米酒”、“虫草巴戟酒”、“巴戟高级可乐”等,技有限公司生产),Sigma3K3D高

6、速冷冻离心机,岛深受国内外消费者欢迎.巴戟天还可蒸鸡、炖肉,作津UV-120紫外可见分光光度计,BrukerTensor37为药膳进补,素有南方“高级参”美称.目前对巴戟红外光谱仪,ChristALPHA2-4冻干机,Waters高效液相色谱仪,HP4890D气相色谱仪等.收稿日期:2005-04-013基金项目:广东省科技攻关项目(2003C104025)1.2巴戟天多糖的分级纯化方法作者简介:何传波(1978-),男,博士生,主要从事多糖物1.2.1巴戟天多糖的提取方法质及其综合利用研究.E2mail:

7、hwctbt@sina.com将烘干的巴戟天粉碎过筛,经乙醚回流脱酯后,30华南理工大学学报(自然科学版)第33卷于60℃热水浸提两次,每次2h,抽滤,合并滤液,减氯硅烷,于60℃振荡反应30min,制备的三甲基硅醚压浓缩,加入5倍体积的95%(体积分数,下同)乙衍生物用于气相色谱分析(HP4890D气相色谱醇沉淀,低温静置过夜,离心(转速4000r/min),沉仪),数据处理软件为HP3398AGCChemstation.气淀加蒸馏水溶解,再次重复乙醇沉淀的步骤两次,最相色谱分析条件为:HP-5石英毛细管

8、柱(15m×后一次得到的沉淀用少量水溶解,按一定的体积比0.53mm);柱温:130℃保温1min,5℃/min升温至加入Sevage试剂(正丁醇/氯仿的体积比为3/1)脱180℃保温2min,再以5℃/min升温至220℃,保蛋白5次,浓缩,冷冻干燥,得到紫褐色的巴戟天粗温2min;检测器和进样口温度均为230℃;载气N2多糖样品———MOHP.流速:20mL/min;H2流速:30mL/min;空气流速:1.

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